干扰素诱导蛋白p204过表达抑制大鼠主动脉血管-国家心血管病中心.pdfVIP

1110 中国循环杂志 2015 年 11 月 第 30 卷 第 11 期（总第 209 期）Chinese Circulation Journal，November，2015，Vol. 30 No.11（Serial No.209） 基础与实验研究 干扰素诱导蛋白 p204 过表达抑制大鼠主动脉血管外膜成纤维细胞 增殖与迁移 * 宋方，田茂波 ，肖燕，龙向淑，吴强 摘要 目的：观察干扰素诱导蛋白 p204 过表达对大鼠主动脉血管外膜成纤维细胞（VAFs）凋亡、增殖与迁移的影响。 方法：分别应用携带 p204 基因（Ifi204）的慢病毒颗粒（Ifi204-Lv 组）、空载慢病毒颗粒（Con-Lv 组）感染 VAFs，未 经处理的 VAFs 作为阴性对照组。用噻唑蓝（MTT）比色法检测 VAFs 增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，细胞划痕法和 Transwell 法测定细胞迁移情况，应用实时定量逆转录 - 聚合酶链反应（realtime q RT-PCR） 和蛋白免疫印迹（Western blotting）分别检测 p204、抑癌因子 p53 及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子 p21WAF （p21）的 mRNA 和蛋白表达。 结果： Ifi204-Lv 组与 Con-Lv 组、阴性对照组相比较，细胞增殖降低［（吸光度值），48 h：0.53 ±0.05 vs 0.66±0.03、0.63 ±0.06；72 h: 0.89±0.06 vs 1.02±0.06、1.01±0.07］及迁移距离缩短［（像素），61.00±1.83 vs 74.50±6.25、75.50±7.85］、 数量降低（61.75±10.69 vs 155.25±10.21、153.75±9.40），差异均有统计学意义（P 均＜ 0.05），但组间比较细胞凋亡率 差异无统计学意义。 与 Con-Lv 组、阴性对照组相比，Ifi204-Lv 组的 p204（3.45±0.15 vs 2.09±0.10、2.06±0.09）、p53 （3.41±0.09 vs 2.06±0.07、2.10±0.06）及 p21（3.01±0.08 vs 2.05±0.06、2.11 ±0.08）的 mRNA 和蛋白表达均上调，差异 均有统计学意义（P 均＜ 0.05）。 结论： p204 过表达可抑制大鼠 VAFs 增殖与迁移，其机制可能部分与激活 p53 及 p21 表达有关。 关键词 干扰素诱导蛋白； p204；血管外膜成纤维细胞；凋亡；增殖；迁移 Interferon-induced Protein 204 Over-expression Inhibits Aortic Vascular Adventitial Fibroblast Proliferation and Migration in Experimental Rats SONG Fang, TIAN Mao-bo, XIAO Yan, LONG Xiang-shu, WU Qiang. Department of Cardiology, Guizhou Provincial People’s Hospital, Guiyang (550002), Guizhou, China Corresponding Author: WU Qiang, E-mail: gzgywq@126.com Abstract Objective: To observe the effects of interferon-induced protein 204 (p204) over-expression on apoptosis, proliferation and migration of aortic vascular adventitial fibroblast (VAFs) in experimental rats. Methods: Our research included in 3 groups: Ifi204-Lv group,