混合重金属离子诱导的鲫鱼dna损伤与基因表达.pdfVIP

核 农 学 报 　2003 ,17 (3) :199～202 199 　 Acta Agriculturae N ucleatae Sinica ( ) 文章编号 2003 0319904 混合重金属离子诱导的鲫鱼 DNA 损伤与 基因表达 1 2 3 朱国念 　周新文 　孙锦荷 ( 1 浙江大学农药研究所 ,浙江 杭州 　310029 ; 2 苏州大学核医学院 ,江苏 苏州 　215007 ; 3 浙江大学核农所 ,浙江 杭州 　310029) 摘 　要 :本研究结果表明 ,混合重金属离子诱导了鲫鱼鱼鳃 、肝脏组织产生脂质过氧化 ( ) ( ) 作用 LPO ;鱼鳃 、肝脏组织中的LPO 产物丙二醛 MDA 含量与暴露浓度呈指数效应 关系 ;鱼鳃 、肝脏的指数方程分别为 Y = e - 287X + 0687 和 Y = e - 219X + 0115 ;LPO 引发了DNA 3 链的断裂损伤 ; HTdR 在鱼鳃 、肝脏细胞 DNA 中大量掺入 ,并与重金属离子暴露浓 度间呈双向效应 ;重金属离子的暴露极大地提高了鲫鱼肝脏 DNA 的总甲基化水平 ; 重金属离子的毒性作用干扰了鲫鱼细胞的正常生理周期和基因的表达 ,是引发水生 生物基因毒性作用的主要机制 。 关键词 :重金属离子 ;鲫鱼 ;DNA ;损伤 ;表达 在实际的自然环境中常存在低浓度的混合污染物 ,尤其是重金属离子 ,能长期存在于自然 水体中 ,又可通过富集作用大量积累于水生生物体内。研究表明污染物之间的确存在着相互 作用 ,使其在生物体内的吸收、积累改变 ,进而影响它们的毒性效应[ 1～3 ] 。同时 ,As 、Cd 、Pb 、Ni 等重金属离子具有遗传毒性效应[4～5 ] ,因此 ,为进一步明确低浓度下混合重金属离子实际的基 因毒性效应和机制 ,在对京杭运河污染水平调查的基础上 ,选择 Zn 、Pb 、Cd 、Cu 4 种主要污染离 子 ,研究了这 4 种混合重金属离子对鲫鱼细胞 DNA 链的损伤与基因表达的影响 。 1 　材料与方法 11 　试剂与设备 提取缓冲液为 100mmol/ L TrisHCl ( 02mlL 蔗糖 , 50mmolL EDTA , 100mmolL TrisHCl ) ( ) ( ) p H74 ;TE 缓冲液为 10mmolL TrisHCl p H80 ,EDTA p H80 ,高压灭菌后储存于 4 ℃冰箱中 ( ) ( ) 备用 ;胞嘧啶和甲基化胞嘧啶标样 色谱纯 均购 自Sigma 公司 ,CuCl 、ZnSO 、CdCl 及 Pb NO 2 4 2 3 2 3 (3 ) ( 均为分析纯 , H胸腺嘧啶核苷 HTdR