鲍鱼来源褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化-大连海洋大学.pdfVIP

第32卷第5期 大 连 海 洋 大 学 学 报 Vol.32 No.5 2017年10月 JOURNAL OF DALIAN OCEAN UNIVERSITY Oct . 20 17 DOI:10.16535/ j.cnki.dlhyxb.2017.05.012 文章编号:2095-1388(2017)05-0574-10 鲍鱼来源褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化 1 1、2 1 1 李云涛 , 汪立平 , 张孟 , 张宇 (1郾 上海海洋大学 食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心, 上海201306;2郾 上海海洋大学 食品学院食品热加工工 程技术研究中心, 上海201306) 摘要:为筛选得到高效产褐藻胶裂解酶 (Alginate lyase) 微生物菌株, 实现其商业化应用, 采用平板透明 圈法从皱纹盘鲍Haliotis discus hannai肠道中筛选得到1株高效产胞外褐藻胶裂解酶的菌株SS-1, 在扫描电 子显微镜下观察菌株形态和平板菌落特征, 并根据其16SrRNA基因序列分析结果, 鉴定该菌株为弧菌Vib鄄 rio sp郾SS-1。 对SS-1菌株的发酵条件进行优化, 结果显示, 该菌株最适发酵温度为30 益, 初始pH值为 7郾2, 培养28 h后酶活力可达38郾6 U/ mL; 通过响应面法优化最佳发酵培养基配方, 结果为麦芽糖 11郾86 g/ L、 酵母粉16郾72 g/ L、 K HPO 1郾36 g/ L、 MgSO ·7H O1郾5 g/ L、 FeSO ·7H O0郾1g/ L、 NaCl6郾75 g/ L; 2 4 4 2 4 2 在最佳培养条件下, 酶活力可达191郾8 U/ mL, 较优化前提高了4郾97倍。 研究表明: 该菌株具有生长快速、 酶活较高的特点, 可为褐藻寡糖的制备提供技术积累。 关键词:褐藻胶裂解酶; 褐藻寡糖; 海洋弧菌; 筛选与鉴定; 响应面法 中图分类号: Q815摇 摇 摇 摇 文献标志码: A [12] 摇 摇 褐藻胶 (Alginate) 作为一种高分子多糖, 广 1984年, Hansen等 首次从土壤和海水中分 泛存在于海带、 海藻、 羊栖菜等海洋藻体的细胞壁 离得到一株产褐藻胶裂解酶的芽孢杆菌JBH2, 此 中, 并以褐藻酸盐的形式存在, 其分子结构是由 后, 不同来源的菌株开始不断被关注, 寻找新的产 琢-L-古罗糖醛酸 (PolyG) 与 茁-D-甘露糖醛酸 褐藻胶裂解酶菌株及不同类型的褐藻胶裂解酶成为 (PolyM) 通过琢/ 茁-1,4糖苷键链接而成的线性多 该领域的研究方向。 近年来, 诸多研究者从海洋藻 聚合体化合物。 褐藻胶裂解酶 (Alginate lyase) 是 类及土壤中发现了产褐藻胶裂解酶菌株, 并从马尾 以海洋褐藻类中所含褐藻胶为底物制备的具有多功 藻、 巨藻、 海带等大型海藻资源中得到了假交替单 [13] 能活性低聚褐藻寡糖的关键酶,