创伤弧菌铁调基因犳狌狉的原核表达及多克隆抗体制备-金属学报.pdfVIP

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2018-11-26 发布于天津
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创伤弧菌铁调基因犳狌狉的原核表达及多克隆抗体制备-金属学报.pdf

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创伤弧菌铁调基因犳狌狉的原核表达及多克隆抗体制备-金属学报

福建农业学报（）：，：／／３１９９１２９１６２０１６ｈｔｔｗｗｗ．ｆｎｘｂ．ｃｎ～ｐｊｙ：／犉狌犻犪狀犑狅狌狉狀犪犾狅犃狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊ｄｏｉ１０．１９３０３．ｉｓｓｎ．１００８０３８４．２０１６．０９．００３犼犳犵ｊ李素一，张丽娟，陈华，等创伤弧菌铁调基因的原核表达及多克隆抗体制备［］福建农业学报，，（）：．犳狌狉Ｊ．２０１６３１９９１２－９１６．，，，ＬＩＳＹＺＨＡＮＧＬＪＣＨＥＮＨｅｔａｌ．ＰｒｏｋａｒｏｔｉｃＥｘｒｅｓｓｉｏｎａｎｄＰｏｌｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｆｏｒＦｅｒｒｉｃＵｔａｋｅＲｅｕｌａｔｏｒＰｒｅａｒｅｄｆｒｏｍ犞犻犫狉犻狅ｙｐｙｙｐｇｐ［］，，（）：狏狌犾狀犻犻犮狌狊ＦＪ０３Ｘ２Ｊ．犉狌犻犪狀犑狅狌狉狀犪犾狅犃狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲狊２０１６３１９９１２－９１６．犳犼犳犵创伤弧菌铁调基因犳狌狉的原核表达及多克隆抗体制备   李素一，张丽娟，陈华，柯翎，陈叙，林晨韬　　　（福建省农业科学院生物技术研究所，福建福州３５０００３）　　摘要：应用方法克隆了创伤弧菌株的铁调基因（），ＰＣＲ犞犻犫狉犻狅狏狌犾狀犻犻犮狌狊ＦＪ０３Ｘ２狌狉Ｆｅｒｒｉｃｕｔａｋｅｒｅｕｌａｔｏｒ　犳犳ｐｇ该基因片段大小为４５０ｂｐ，编码１４９个氨基酸；以ｐＥＴ３２ａ为表达载体，构建了原核表达质粒ｐＥＴ３２ａＦＵＲ，表达质粒测序结果表明目的基因与ＧｅｎＢａｎｋ中报道的创伤弧菌犳狌狉基因的同源性达９８％以上；诱导表达获得可溶性的重组表达蛋白。镍离子金属螯合亲和层析介质（）纯化，电泳分析其分子ｒＦＵＲＮｉＮＴＡｒＦＵＲＳＤＳＰＡＧＥ量约。以纯化后的融合蛋白为抗原，次免疫大鼠，制备抗蛋白大鼠多克隆抗体。用３３ｋＤｒＦＵＲ４ＳＤｒＦＵＲＥＬＩＳＡ方法检测鼠多克隆抗体的效价达到１∶２５６０００，表明融