上皮-间质转化和胰岛素样生长因子ⅰ型受体在非小细胞肺癌-tumor.pdfVIP

肿瘤2013 年2 月第33 卷第2 期　TUM OR Vol. 33, February 2013　　 103 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.02 .001 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 上皮-间质转化和胰 岛素样生长因子 Ⅰ型受体在非小细胞肺癌EGFR- TKIs获得性耐药 中的作用 1 2 2 1 王津京 ，张为民，陈　蓓 ，林建光 1. 南方医科大学广州临床医学院，广东广州　510515 ；2 . 广州军区广州总医院肿瘤科，广东广州　510010 [ 摘要 ]　目的：探讨上皮 - 间质转化 （epithelial-mesenchymal transition ，EMT ）和胰岛素样生长因子 Ⅰ型受体 （insulin-like growth factor Ⅰreceptor ，IGF-1R ）在非小细胞肺癌 （non-small cell lung cancer ，NSCLC ）对表皮生 长因子受体 - 酪氨酸激酶抑制剂 （epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors ，EGFR-T KIs ）获得性 耐药中的作用。方法：选用 EGFR 基因突变型和野生型的人肺腺癌细胞 PC-9 和 H460 ，分别用吉非替尼和厄洛替 尼将其诱导成耐药的 PC-9/ZD 和 H460/ER 细胞。MTT 法检测各组细胞的增殖情况，划痕实验及 Transwell 侵袭 实验检测细胞迁移和侵袭能力，蛋白质印迹法和 RT-PCR 法分别检测 IGF-1R 及 EGFR 信号通路分子及 EMT 相 关分子的蛋白和 mRNA 表达。结果：PC-9/ZD 和 H460/ER 为 EGFR-T KI 获得性耐药细胞，分别对吉非替尼和 P ＜ 0.05 ）。与 PC-9 和 H460 细胞相比，耐药的 PC-9/ZD 和 厄洛替尼的敏感性显著下降，差异有统计学意义 （ H460/ER 细胞形态呈现间质细胞表型，细胞侵袭和迁移能力增加 （P ＜ 0.05 ）。PC-9/ZD 和 H460/ER 细胞中间 质标志分子 vimentin 的 mRNA 和蛋白表达量均显著增加 （P ＜ 0.05 ），PC-9/ZD 细胞的 E-cadherin 表达量显著减 少 （ P ＜ 0.05 ）。与 PC-9 和 H460 细胞相比，PC-9/ZD 与 H460/ER 细胞的 IGF-1R 及其磷酸化蛋 白表达量显著 增加 （P ＜ 0.05 ），AKT 和 ERK 磷酸化水平明显上调 （P ＜ 0.05 ）。PC-9/ZD 细胞的 EGFR 磷酸化水平与 PC-9 细胞相比未见明显差异 （P ＞ 0.05 ），而 H460/ER 细胞的 EGFR 磷酸化水平较 H460 细胞显著降低 （P ＜ 0.05 ）。 结论：EGFR 突变型 PC-9 细胞和野生型 H460 细胞的获得性耐药细胞中均发生了 EMT ，并且 IGF-1R 信号蛋白 表达增多，提示 EMT 及 IGF-1R 信号转导通路均可能在 NSCLC 的 EGFR-T KIs 获得性耐药中起重要作用。 [ 关键词 ]　癌，非小细胞肺；抗药性，肿瘤；蛋白激酶抑制剂；胰岛素样生长因子Ⅰ；上皮- 间质转化；表皮生 长因子受体- 酪氨酸激酶抑制剂 [中图分类号]　R734.2 [文献标志码]　A [文章编号]　1000-7431 (2013) 02-0103-08 Ⅰ The role of epithelial-mesenchymal transition and insulin-like growth f