COX-2和PTEN表达与胃癌浸润程度的关系.pdfVIP

王晓英等 COX-2和PTEN表达与 胃癌浸润程度 的关系 第2O期 · 4985 · COX-2和 PTEN表达与 胃癌浸润程度的关系 王晓英 屈昌民 梁淑文 曹艳菊 郭红媛 李连勇 (中国人民解放军第306医院消化科，北京 100101) [摘 要] 目的 分析病灶组织的cox-2和PTEN表达与胃癌浸润程度的相关性，从而探讨COX-2和PTEN表达检测在评价胃癌浸润中的临 床价值。方法 按照cT和病理T(胃壁浸润度)分期标准分别选择20例T1、1’2、13和T4期患者，以20例健康者为对照。采用荧光 定量PCR定量 分析患者病灶细胞 COX-2和PTENmRNA转录量，采用Western印迹分析所有患者病灶细胞内COX-2和PTEN蛋白表达量，并采用免疫组化方法分 析其表达阳性率。结果 胃癌 胃壁病灶组织COX-2mRNA、蛋白表达量和阳性率均显著高于对照组 (P0．05)，PTENmRNA、蛋白表达量和阳性率 均显著低于对照组 (P0．05)。随着胃癌浸润程度增加，病灶组织细COX-2mRNA、蛋白表达量和阳性率逐渐增加，PTENmRNA、蛋白表达量和阳性 率逐渐下降。结论 COX-2和PTEN基因表达与胃癌浸润程度高度相关性，具有评价胃癌浸润程度的潜在价值。 [关键词] COX-2；PTEN；浸润 [中图分类号] R735．2 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9202(2013)20-4985-03；doi：10．3969／j．issn．1005-9202．2013．20．020 胃癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤 ，发病率呈上升趋 poeia的FirstStrandcDNASynthesisKit合成cDNA库 ，并定量。 势。胃壁浸润程度的检查可用于评价 胃癌进展程度。肿瘤标 以$一actin基 因为内参 ，对单位 cDNA中的 COX．2和 PTEN的 志物或肿瘤相关基因与癌症的相关性是近几年研究热点，例如 eDNA进行特异性定量扩增。引物为：13一actin前 向：5．CTC． 不同进程 胃癌血清和病灶组织中CEA、CA19-9等 mRNA转录 CATCCTGGCCTCGCTGT一3，8一actin 反 向：5．GCTGTCACCT． 和蛋白表达均呈现 出显著性差异 ，具有 胃癌分型的潜在价 TCACCGTYCC-3-，COX一2 前 向：5-TCAAGTCCCTGAGCATC． 值 。本文研究病灶组织 COX-2和PTEN表达与 胃癌 胃壁浸 TACG-3，COX一2 反 向：5-ACATrCCTACCACCAGCAACC-3． 润程度的相关性，从而评价COX-2和PTEN表达检测在 胃癌浸 PTEN前 向：5-CCATAACCCACCACAGC-3-，PTEN 反 向：5． 润转移诊断中的临床价值。 AGTCCGTCCCTIrCCAG-3-。按照ROCHSYBRGreen荧光定量 PCR试剂盒配置反应体系，并设置扩增参数 ，在伯乐的IQ5 1 资料与方法 PCR系统 中扩增，计算每个样 品 COX-2、PTEN和 GAPDH的 1．1 临床资料 从我院2011年2月至2012年 1月确诊 胃癌 △ct，并采用△△ct法计 QD算每个样品中COX-2和PTEN的 病例中抽取8O例不同胃癌浸润患者，按照CT和病理浸润分期 mRNA转录倍数。 评价标准 ，分为 T1、，I2、 和 T4期，各 20例。另外以2O例健 1．4 Western印迹 收集所有病灶组织，称量定质量。用缓冲 康者为对照组 ，未患任何消化道疾病和任何肿瘤疾病。Tl期 溶液 (50mmol／LTris—HC1，pH7．4，5mmol／LEDTA，2mmol／L 患者男 l2例，女8例，平均 (61．3±5．7)岁 ； 期男 1O例，女 PMSF，20 g／mlaprotinin，20g／mlleupep