RNA干扰TLR4信号通路对枯否细胞吞噬功能的影响.pdfVIP

322 主垡塞 塑 重兰銎查 生 旦笙 !鲞笠 塑 ne 曼xpClinVirol，October2013，Vo1．27，No．5 ． 论 著 ． RNA干扰TLR4信号通路对枯否细胞 吞噬功能的影响 臧淑妃 ，刘静 ，柳银兰，杨文君 ，罗燕，庄振杰 ，焦其彬 ，陈建玉，卞冬雪，马晓洁，苟运浩， 朱明利 ，施军平 【摘要】 目的 探讨 RNA干扰 Toll样受体 4(Toll—likereceptor4，TLR4)信号通路对枯否细胞 (Kupffercells，KCs)吞噬功能 的影响 。方法 以RAW 264．7小鼠单核巨噬细胞 白血病细胞为研究对 象 ，经 QPCR验证得到最优干扰 RNA为 Tlr4一BUS一1567后 ，以正常细胞为对照组 ，NegativeControlRNA 干扰为 NC对照组，TlI4一mus一1567RNA干扰为实验组 ，倒置显微镜观察各组细胞吞噬酵母菌情况 ，并 测定各组的吞噬细胞百分数和吞噬指数 ，组 问进行 比较。结果 实验组平均吞噬细胞百分数较正常 对照组 明显降低 (17．67％ 4-3．51％和32．00％ -43．00％，P0．01)，实验组平均吞噬指数较正常对照 组明显降低 (46．33％ -47．51％和 82．00％-46．08％，P0．O1)。结论 RNA干扰 TLR4信号通路能 降低 KCs的吞噬功能。 【主题词】 枯否细胞； 肝疾病； 受体，Toll； 吞噬作用 TheeffectofRNA interfering TLR4 signalpathway on phagocytosisofKupffer cells ZANG Shu— fei’，LIUJing，LIUYin—lan，YANGWen~un，LUOYan，ZHUANGZhen-fie，JlA0Qi—bin，CHENJian—yu， BIAN Dong-xue，MA Xiao-jie，XUN run—hao，ZHU Ming—li，SHIJun-ping． Zhejiang University of TraditionalChineseMedicine，Hangzhou310053，China Correspondingauthor：SHIJun-ping，Emaif：davidshiO571@ 126．con 【Abstract】 Objective ToinvestigatetheeffectofRNA interferingTLR4signalpathwayOn phagoeytosisofKupffercells．M ethods RAW2647 mice mononuclearmacrophage leukemia cellswere observed．ThetestedgroupwasinterferedbvTlr4一mus一1567 RNA whichhad thebestresultconfirmedby QPCR，cellsinterferedbyNegativeControlRNAasNCgroup，andnormalcellascontro1．Weperformthe phagocytosisteston each group．Results Thetestedgroup haslowerphagocytespercentagethan control (17．67％ -43．51％ VS32．00％ ±3．OO％ ，P0．01)，andlowerphagocyticindex(46．33％ -47．51％ VS 82．00％ -46．08％ ．P0．01)．Conclusions DecreasedphagocyticactivitywasobservedonKupffercells byRNA interference． 【Keywords】 Kupffercells； LiverDiseases； Receptors，Toll； Phagocytosis Toll样受体作为一种模式识别受体 (pattern． fattyliverdisease，NAFLD)关系密切的是 TLR4。肝 recognition，PPR)，能 够 与 病 原相 关 模 式 分 子 脏内TLR4主要位于 KC