大学生物遗传学：第七章基因的表达与调控(下)—真核基因表达调控的一般规律.ppt

增强子作用机理： （3）沉默子：某些基因含有负性调节元件——沉默子，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 （三）反式作用因子 1、定义：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件的核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 TFⅡD（TATA）、CTF（CAAT）、SP1（GGGCGG）、HSF（热激蛋白启动区） 2、结构 DNA结合结构域 转录活化结构域 反式作用因子 连接区 DNA结合结构域： 螺旋-转折-螺旋（Helix-turn-helix，H-T-H） 锌指结构（zinc finger） 碱性-亮氨酸拉链（basic - leucine zipper） 碱性-螺旋-环-螺旋（basic – helix /loop /helix，bHLH） 螺旋-转折-螺旋 锌指结构 配位键 2-9个 定义：是一种常出现在DNA结合蛋白中的结构基元（motif）。是由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn构成，形成的结构像手指状。 Cys2 / Cys2锌指 Cys2 / His2锌指 见于甾体激素受体 见于SP1，TF ⅢA等 转录因子SP1 （GC盒） 、连续的3个锌指重复结构。 碱性-亮氨酸拉链 二聚体 亮氨酸之间相互作用形成二聚体，形成“拉链” 。 肽链氨基端有一个含20～30个碱性氨基酸的结构域，能与DNA结合。 碱性-螺旋-环-螺旋 （四）转录起始复合物 （一）概 述 单细胞生物 —— 直接作出反应 多细胞生物 —— 通过细胞间复杂的信息传递系统来传递信息，从而调控机体活动。 外界环境变化时 二、真核基因转录调控的主要模式 信息传递 → 反式作用因子的活性 跨膜信息传递的一般步骤： 特定的细胞释放信息物质 信息物质经扩散或血液循环到达靶细胞 与靶细胞的受体特异性结合 受体对信息进行转换并启动细胞内信使系统 靶细胞产生生物学效应 细胞间信息物质：是由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质的统称，又称作第一信使。如生长因子、细胞因子、胰岛素等 第二信使(secondary messenger)：在细胞内传递信息的小分子物质，如：Ca2+、IP3、DAG、cAMP、cGMP等。 受体：是细胞膜上或细胞内能特异识别信息物质并与之结合的成分。它是一种能把识别和接受的信息正确无误地放大并传递到细胞内部、进而引起生物学效应的特殊蛋白质，个别是糖脂。 配体(ligand)：能与受体特异性结合的信息物质。 二、基因扩增 基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，它使得细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要，是基因活性调控的一种方式。 如非洲爪蟾卵原细胞中rRNA基因（rDNA）扩增是因发育需要而出现的基因扩增现象。 基因组拷贝数增加，即多倍性，在植物中是非常普遍的现象。基因组拷贝数增加使可供遗传重组的物质增多，这可能构成了加速基因进化、基因组重组和最终物种形成的一种方式。 发育或系统发生中的倍性增加在植物中普遍存在 DNA含量的发育控制 利用流式细胞仪对从拟南芥不同发育阶段的组织中分离到的间期细胞核进行分析，发现多倍体的DNA含量与组织的成熟程度成正比。对于一给定的物种，C是单倍体基因组中的DNA质量。 将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录，这种方式被称为基因重排。 通过基因重排调节基因活性的典型例子是免疫球蛋白结构基因的表达。 三、基因重排 四、DNA的甲基化与基因表达调控 1.DNA的甲基化 在真核生物中，5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG序列、CpXpG、CCA/TGG和GATC中 CpG二核苷酸通常成串出现在DNA上，CpG岛 真核生物细胞内存在两种甲基化酶活性： 日常型甲基转移酶：催化处于半甲基化的DNA双链分子上与甲基胞嘧啶相对应的胞嘧啶甲基化。 从头合成型甲基转移酶：催化未甲基化的CpG成为mCpG 2.DNA甲基化抑制基因转录的机理 DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，即抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。 五、染色质的结构与基因表达调控 按功能状态的不同可将染色质分为活性染色质和非活性染色质。活性染色质是指具有转录活性的染色质；非活性染色质是指没有转录活性的染色质。 1.活性染色质 活性染色质由于核小体发生构象的改变，往往具有疏松的染色质结构。 “灯刷型”染色体 真核细胞中基因转录的模板是染色质而不是裸露的DNA，因此染色质呈疏松或紧密结构，即是否处于活化状态是决定RNA聚合酶能否有效行使转录功能的关键。 疏松的染色质结构便于转录调控因子与顺式调控元件结合和RNA聚合酶在转录模板上滑动。 活性染色质上具有DNaseI超敏感位点。每个活