利用子房滴注法获得转高亲和性钾离子转运蛋白基因（AlHAK）棉花植株.pdfVIP

棉 花 学报 Cotton Science 20 15袁27 1冤院9―15 用子房滴注法获得转高亲和性钾离子转运蛋白基因 1冤 棉花植株 1,2 1 1 1 3 1 1 1 1 1 1* 刘灵娣 唐宏亮 董丽君 张书玲 吴立柱 杜环 高佳佳 赵晓雅 刘晗 蒋肖 刘建凤 (1. 河北大学生命科学学院 北保定071002 曰2. 北省农林科学院经济作物研究所 石家庄050051 曰 3. 北农业大学生命科学学院, 北保定071001冤 摘要院棉花植株再生困难尧基因型依赖性强和转化周期长等因素一直制约着棉花遗传转化的发展遥 本研究利用 1 种不依赖组织培养的转化方法 即子房滴注转化方法将獐茅高亲和性钾离子转运蛋白基因渊 1冤导入 棉花基因组中遥 结果表明在1006 株转化幼苗中有44 株为卡那 性植株 其中35 株经PCR 检测为阳性渊T0 代冤 转化率为3.5%遥 Southern 与Northern 杂交结果进一步表明外源基因已整合至棉花基因组中并在转录水 平上表达遥 在提供外源0.05 mmol 窑L 1 K+ 水平下 T1 转基因棉花叶片中K+ 含量约为对照植株的2 倍 在根中 约为野生型植株的1.5 倍曰 而在2.5 mmol 窑L 1 K+ 的正常水平下 转基因棉花与野生型植株K+ 含量差异不明 显遥 在50～200 mmol 窑L 1 NaCl 胁迫条件下 转基因棉花的种子发芽率明显高于野生型植株 尤其是在150 mmol 窑L 1 NaCl 胁迫条件下 转基因植株种子的发芽率是野生型的2.8 倍左右遥 本研究为子房滴注转化体系在 生产实践中的广泛应用提供了理论依据 并为培育适应土壤钾素匮乏及盐渍化环境下生长的棉花新品种提供 了新的种质资源遥 关键词院棉花曰子房滴注转化曰钾离子转运蛋白曰转基因植株曰钾营养曰盐胁迫 中图分类号院S562.035 文献标志码院A 文章编号院1002-7807 20 15冤01-0009-07 1,2 1 1 1 3 1 1 Liu Lingdi , Tang Hongliang , Dong Lijun , Zhang Shuling , Wu Lizhu , Du Huan , Gao Jiajia , Zhao Xiaoy- 1 1 1 1* a , Liu Han , Jiang Xiao , Liu Jianfeng (1. 071002, ; 2. 050051, ; 3. 07 100 1, ) The progress for development of transgenic engineering of cotton is restricted by plant regeneration difficulty, geno- type-dependent response and a prolonged culture period and so on.