梵净山七叶一枝花总黄酮含量测定.docVIP

梵净山七叶一枝花总黄酮含量测定 　　摘 要：采用紫外分光光度法对不同生长年限的梵净山珍稀药用植物七叶一枝花总黄酮的含量进行了测定。结果表明，不同生长年限的七叶一枝花，其总黄酮含量不同。1年生的总黄酮含量为3.86mg/g，4年生的总黄酮含量为4.91mg/g，8年生的总黄酮含量为5.29mg/g。该研究可为发展铜仁药材经济、提高药农种植积极性、带动药农增收、推动地方特色药用植物发展提供科学的理论依据。 关键词：七叶一枝花；总黄酮；含量；梵净山 中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）20-25-02 梵净山是国家级重点自然保护区，1986年加入联合国教科文组织世界生物圈保护区网络，以保护森林生态系统和珍贵动植物物种及其独特的景观资源为主[1]。其保护区内及其周边生长有珍稀药用植物七叶一枝花。七叶一枝花（Paris polyphylla），百合科重楼属多年生草本植物，属珍稀濒危植物[2]，在我国浙江、江苏、江西、福建、安徽、湖北、四川、云南、广西、贵州等地均有分布[3]。其药用历史悠久，药用价值大[4]。以重楼和七叶一枝花为主要原料的云南白药喷雾剂已经是家喻户晓的知名药剂，50g瓶装市场价为30元左右，现在已作为家庭必备的常规药之一。作为季德胜蛇药片主要药用成分之一的七叶一枝花，主治清热解毒、消肿止痛，是毒蛇、毒虫咬伤的良药，现市场销售单价为每盒（0.4g×60粒）19元，且市场销售量大。七叶一枝花也是宫血宁胶囊药用成分之一。宫血宁胶囊主治功能性子宫出血、产后出血、缩宫、消炎，是医院、诊所、家庭常用药，市场单价每盒（每粒装0.13g，每盒18粒）为17.5～19.8元。七叶一枝花除了是云南白药、季德胜蛇药片、宫血宁胶囊的主要药用成分之一之外，它还广泛用于多种中药制剂中，如抗病毒颗粒、抗病毒冲剂、红药、热毒清等重要中成药。武珊珊等归纳了七叶一枝花化学成分、药理作用和临床应用等研究结果，指出七叶一枝花作为抗肿瘤药和妇科用药的开发具有良好的前景[5]。目前，七叶一枝花原材料的市场收购价至少140元/kg以上，零售价800～2 000元/kg。国内市场需求量达3 000t以上，而现供应量仅为1 500多t，供求矛盾突出[6]。据有关分析报告指出，预计未来2a之内，新兴医药市场的市场潜力年度增幅将高达19%。伴随着科学技术和医药技术的飞速发展，综合社会各阶层的需求，以七叶一枝花为原料开发一系列中药、中成药、美容产品及其他附属产品越来越多，从而带动一批医药企业和种植企业的发展。由于稳定、确切的疗效和新功能的发现，七叶一枝花药材的需求逐年增多，其开发前景大。目前，有关七叶一枝花的研究主要集中在人工栽培技术[7-8]、皂苷含量[9]和引种驯化[10]等方面。用比色法测定总黄酮含量已经广泛应用于枣果、刺梨、葛根、苦杏仁和杨梅[11-15]等植物。笔者用紫外分光光度法对梵净山珍稀药用植物七叶一枝花总黄酮含量进行了测定，旨在为发展铜仁药材经济、提高药农种植积极性、带动药农增收、推动地方特色药用植物发展提供科学的理论依据。 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 1.1.1 材料 1年生的七叶一枝花购自梵净山保护区内药农；4年生和8年生的七叶一枝花采自铜仁梵净山保护区周边地区。 1.1.2 试剂 芦丁、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠，以上药品和试剂均为分析纯。 1.1.3 仪器设备 T6新世纪紫外可见分光光度计，AL204型电子天平，DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱，80-2离心机，超声波清洗器。 1.2 总黄酮含量的测定[16] 1.2.1 标准曲线的绘制 精确称取10mg芦丁，用90%乙醇定容至100mL，精确量取0、0.2、0.5、1、2、3、4mL分别置于10mL容量瓶中，加入5g/100mL亚硝酸钠0.4mL，放置6min后加入10g/100mL硝酸铝0.4mL，放置6min后再加入4g/100mL的氢氧化钠4mL，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀，放置15min后在波长510nm处测定吸光度。其标准曲线方程为y=0.082 3x-0.003 3，R2=0.999 3。标准曲线见图1。 1.2.2 样品的测定 称取七叶一枝花粉末1.000g于100mL三角瓶中，以90%的乙醇作为浸提试剂，在70℃下进行超声浸提3次，每次30min，3 000r/min离心10min，上清液加入5g/100mL亚硝酸钠0.4mL，放置6min后加入10g/100mL硝酸铝0.4mL，放置6min后再加入4g/100mL的氢氧化钠4mL，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀，放置15min后以空白溶液作为对照，在波长510nm处测定吸光度。 2