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- 2017-12-03 发布于贵州
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【精选】RNA提取方法及原理
RNA提取方法及原理 John 1、研究背景 1.1 RNA研究的重要性 DNA,RNA和蛋白质是三种重要的生物大分子,是生命现象的分子基础。 DNA的遗传信息决定生命的主要性状,而mRNA在信息传递中起很重要的作用。其它两大类RNA,rRNA和tRNA,同样在蛋白质的生物合成中发挥不可替代的重要功能。因此mRNA、rRNA、tRNA在遗传信息由DNA传递到表现生命性状的蛋白质的过程中举足轻重。 1.2 RNA分布 2、方法及原理 2.1 RNA的提取流程 1、样本前处理 2、细胞裂解 3、 RNA的纯化及获得 RNA提取流程-- 样品前处理注意点 RNA提取流程--细胞裂解,以释放RNA 异硫氰酸胍/酚-TRNzol总RNA提取试剂 RNA提取流程-- RNA的纯化及获得 2.2 RNA提取的注意事项 2.2.1 杜绝外源酶的污染 一:严格戴好口罩,手套。 二:实验所涉及的离心管,Tip 头,移液器杆,电泳槽,实验台面等要彻底处理。 三:实验所涉及的试剂/溶液,尤其是水,必须确保 RNase-Free。 2.2.2 阻止内源酶的活性 一:选择合适的匀浆方法。 二:选择合适的裂解液。 三:控制好样品的起始量。 2.3 Rnase 污染的10大来源 1:手指头 2:枪头 3:水/
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