磁性分选肺腺癌始动细胞的异常miRNAs验证.pdfVIP

· 74· 13年 10月第 7卷第 20期 ChinJClinic 15．2013．、，01．7 基 础 论 著 ● 磁性分选肺腺癌始动细胞的异常 张振华 杨红茹 周杰 邓曦 吴敬波 林盛 【摘要】 目的 利用磁性活细胞分选法 (magneticactivatedcellsorting，MACS)从人A549肺腺癌细 胞中分离得到CD133标记细胞，通过CD133／CD326双阳性检测探讨分离效果，初步分析差异表达miRNAs 对该亚群细胞的调控功能。方法 将对数生长期的A549细胞离心收集，重悬于无血清培养基中，培养至第 二代后利用 CD133磁珠标记后分选，流式细胞术及免疫荧光验证分选后细胞的CD133／CD326双阳性率； 结合前期实验rniRNA芯片结果，挑选兴趣分子进行定量PCR验证。结果 利用CD133磁珠分选得到的阳 性细胞亚群高表达 CD133／CD326分子，结合前期miRNA芯片结果，选出在CD133／CD326细胞亚群中表 达上调的miR-663，miR-183，IIliR