棉花黄萎病菌VdSge1基因的敲除与功能分析.pdfVIP

棉 花 学 报 Cotton Science 20 15袁27 渊4 冤院346―353 花黄萎病菌 1 基因的敲除与功能分析 * * 高云 孟佩 张婷 黄家风 高峰 ( 河子大学农学院/ 新疆绿洲农业病虫害治理与植保资源利用自治区高校重点实验室 新疆石河子832003) 摘要院为了明确棉花黄萎病菌大丽轮枝菌渊 Kleb.冤的 1 基因功能 本研究利用基因同 源重组原理 通过构建敲除载体 对棉花黄萎病菌落叶型强致病力菌株V592 的 1 基因进行了敲除 获 得了4 个目标基因敲除的突变体曰以野生型菌株V592 为对照 通过对敲除突变体生物学性状和致病性测定 结果表明 突变体的菌落生长速 尧产孢量明显高于野生型 并且丧失对棉花的致病性遥 利用qRT-PCR 对其他 基因在突变体中的表达情况进行分析 结果表明 1 基因敲除后 1尧 和 1 的表达量随 之下降 而 1 和 1 的表达却明显上升遥 由此说明 1 基因与大丽轮枝菌的菌落生长速 尧产孢 量及致病性密切相关 并且可以影响其他一些基因的表达遥 关键词院棉花曰大丽轮枝菌曰 1 基因曰基因敲除曰基因功能 中图分类号院 S435.621 文献标志码院A 文章编号院1002-7807(2015 04-0346-08 10.11963/issn.1002-7807.201504007 * * Gao Yun, Meng Pei, Zhang Ting, Huang Jiafeng , Gao Feng ( 832003, ) Kleb. is a phytopathogenic fungus and causative agent of cotton wilt disease. To characterize the Kleb. gene 1, a targeted gene replacement strategy based on homologous recombination was adopted to gener- ate 1 deletion mutant strains from the virulent defoliating isolate V592 by -mediat- ed transformation. Four 1 deletion mutants were selected for biological function and pathogenicity assays. All 1 deletion mutants displayed greater radial growth and conidia production, as well as a loss in pathogenicity on cotton plants when compared to wild type V592. We also analyzed the expression of series of well-known functional genes in both V592 strain and 1 deletion mutan