砧木南瓜硅转运蛋白基因CmLsi3的克隆与表达分析.pdfVIP

园艺学报，2015 ，42 (10) ：2075 –2082. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0308；http ：//www. ahs. ac. cn 2075 砧木南瓜硅转运蛋白基因CmLsi3 的克隆与表达 分析 1 1 1,2,* 1,2 1,2 1,2 王 慧 ，赵 升 ，魏 珉 ，王秀峰 ，史庆华 ，杨凤娟 1 2 （山东农业大学园艺科学与工程学院，山东泰安 271018 ； 作物生物学国家重点实验室，山东泰安 271018 ） 摘 要：以用于黄瓜嫁接的砧木南瓜‘云南黑籽南瓜’（Cucurbita ficifolia，去蜡粉能力弱）和‘黄 诚根 2 号’（C. moschata，去蜡粉能力强）为试材，采用同源克隆与 RACE 相结合的方法克隆到硅转运 蛋白基因 cDNA 全长，命名为 CmLsi3 （GenBank 登录号分别为 KM203110 和 KM359142 ）。两种砧木南瓜 CmLsi3 基因 cDNA 全长为 1 206 bp，开放阅读框为 795 bp，编码264 个氨基酸，两者仅有 4 个位点的氨 基酸不同，但与黄瓜、玉米、大麦等作物硅转运蛋白氨基酸序列同源性均在 50% 以上。CmLsi3 蛋白含有 2 个 NPA 模体、6 个跨膜结构域以及 1 个由 Gly （G ）、Ser （S）、Gly （G ）和Arg （R ）组成的 ar/R 选择 性过滤器，属于水通道蛋白 NIPⅢ亚家族。实时荧光定量分析表明，CmLsi3 基因在砧木南瓜根、茎、叶 中均有表达，且‘云南黑籽南瓜’各器官 CmLsi3 基因的表达水平高于‘黄诚根 2 号’。 关键词：南瓜；硅转运蛋白基因；克隆；表达分析 中图分类号：S 642.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）10-2075-08 Cloning and Expression Analysis of Silicon Transporter Gene CmLsi3 in Roots of Pumpkin 1 1 1,2,* 1,2 1,2 1,2 WANG Hui ，ZHAO Sheng ，WEI Min ，WANG Xiu-feng ，SHI Qing-hua ，and YANG Feng-juan 1 （College of Horticultural Science and Engineering，Shandong Agricultural University ，Tai’an，Shandong 271018 ，China； 2State Key Laboratory of Crop Biology ，Tai’an，Shandong 271018 ，China） Abstract ：Two pumpkin cultivars for cucumber grafting ‘Yunnan Figleaf Gourd ’（Cucurbita ficifolia） and ‘Huangchenggen 2 ’（C. moschata ），which have weak and strong de-blooming abilities respectively ， were used in this study ，and the full length cDNA of the silicon transporter gene were cloned by RT-PCR and RACE，and named CmLsi3 （G