细胞通讯和信号传导.pptVIP

主要信号转导途径 The major pathways of cellular signal transduction 二、离子通道受体介导的信号转导 配体主要为神经递质 作用：导致细胞膜电位改变 乙酰胆碱受体 组成：5个高度同源的亚基构成，即 α2βγδ每个亚基都是四次跨膜蛋白。 乙酰胆碱的结合部位位于α亚基。 乙酰胆碱受体结构 三、G蛋白偶联受介导的信号转导 配体与受体结合 激活G蛋白 激活或抑制效应分子 效应分子改变细胞内小分子物质的含量和分布（小分子物质不位于能量代谢的中心，浓度和分布改变迅速） 小分子物质作用于靶分子（主要为各种蛋白激酶） 改变代谢过程及基因表达 G蛋白循环 cAMP-蛋白激酶A途径 G蛋白的调节 cAMP的生成与降解 cAMP的作用机制 PKA的作用 cAMP与PKA介导的信号传导.swf (三)胰高血糖素受体通过AC-cAMP-PKA通路介导信号转导 β肾上腺素能受体 胰高血糖素受体 Ca2+-依赖性蛋白激酶途径 在收缩、运动、分泌和分裂等复杂的生命活动中，需要Ca2+参与，，胞浆内Ca2+浓度在0.01-1mol/L比细胞外Ca2+浓度（约2.5mmol/L）低得多。 IP3、Ca2+—钙调蛋白激酶途径 α1肾上腺素能受体 内皮素受体 血管紧张素Ⅱ受体 DG-蛋白激酶C途径 DG+Ca2+ 四、单次跨膜受体介导的信号转导 表皮生长因子受体介导的信号转导途径 淋巴细胞抗原受体介导的信号转导途径 γ－干扰素受体介导的信号转导途径 转化生长因子受体介导的信号转导途径 MAPK信号中分子转位.swf 第三节 细胞信号转导研究的方法和医学中的意义 细胞信号转导异常与疾病 研究方法 信号转导药物 细胞损伤和应激反应中的信号转导 应激激活的信号转导通路： 1、应激原：物理性因素，化学性因素，生物性因素 2、应激激活的信号转导通路：MAPK 家族（SAPK/JNK，P38） 应激激活的信号转导通路的靶蛋白 胞浆蛋白，PLC,PLA，表皮生长因子受体，转录因子 应激激活的信号转导通路的效应 1、产生非特异性防御反应 2、促进细胞增殖分化 3、产生特异性防御反应 4、在细胞凋亡中起作用 血管平滑肌增殖性疾病  正常VSMC：非增殖性的收缩表型 病理VSMC：合成表型，分泌激素，自身肥大、增殖 （一）作用于VSMC的胞外信息分子 1 生物化学性因素： 激素、细胞因子、生长因子 2 机械性因素： 切应力、牵张力 （二）机械性因素引起的信号转导 1 整合素（intergrins)介导的信号转导 机械刺激 ? 细胞外蛋白与整合素相连 ? 改变细胞骨架结构 ? 激活细胞内信息分子 2 离子通道 3 MAPKS 机械刺激同时激VSMC中ERK和SAPK/JNK途径，引起VSMC肥大与增殖。 心肌肥大 机械刺激的感受器 1、离子通道 2、整合素 3、PTK 机械刺激的信号转导途径 1、磷脂酶类 2、 MAPKs联级反应 3、 生长因子分泌 磷酸化的信号转导分子的鉴定 在信号转导过程中可发生多种蛋白底物的磷酸化，包括酪氨酸磷酸化、苏氨酸残基磷酸化及丝氨酸残基磷酸化。它们分别由不同的蛋白激酶所催化。这些磷酸化蛋白通常都为信号转导分子，在信号传递过程中发挥重要的作用。一些信号蛋白结构中含SH-2结构域可同某些磷酸化的酪氨酸残基相结合，使信号得以逐级传递。含酪氨酸磷酸化的蛋白鉴定通常是首先分离粗提蛋白，采用针对含这些氨基酸残基磷酸化蛋白的单克隆抗体进行免疫沉淀(immunoprecipitation),SDS电泳，然而采用Western blotting及immunoblotting鉴定其分子量，进一步利用分子生物学技术克隆信号蛋白，搞清其基因结构和氨基酸序列。 信号转导中第二信使含量的测定 ［Ca2+］i的测定 细胞内Ca2+的测定方法有原子吸收光谱法、离子微电极测定法、放射示踪法及标记示踪法等。目前常用标记示踪法，即用荧光探针标记靶细胞。常用的荧光探针有quin-2/Am、Fura-2/Am及Indo-1等。其中Fura-2/Am和Indo-1较为敏感。 IP3的测定 采用3H-TdR标记的肌醇标记靶细胞后，用不同的刺激剂刺激细胞，分离磷脂酰肌醇混合物，通过阴离子交换层析柱(Serva公司 D