慢病毒包装知识大全.pdfVIP

在细胞相关的实验操作中，对于一些按常规方法难以转染甚至无法 转染的细胞，通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率，以 达到目的基因的高效瞬时表达。在细胞相关的实验操作中，对于一些 按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞，通过病毒介导的实验能够 大大提高基因的转导效率，以达到目的基因的高效瞬时表达。 病毒转染包括以下步骤：1 构建载体 2 包装提纯病毒 3 感染靶细胞。 以慢病毒为例。 慢病 毒 （Lentivirus）载体是以HIV-1 （人类免疫缺陷I 型病毒）为基 础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂 细胞和非分裂 细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快， 研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体 上，从而达到持久性表达。在感染能力方 面可有效地感染神经元细 胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的 细胞，从而达到良好的的基因治疗效果，在美国已经开展了临床研究， 效果非常理想，因此具有广阔的应用前景。 一、慢病毒载体构建原理： 慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成，即包装成分和载体成分。 包装成分由HIV-1 基因组去除了包装、逆 转录和整合所需的顺式作 用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白；载体成分 则与包装成分互补，即含有包装、逆转录和整合所