2011仪器分析习题色谱部分.ppt

速率理论的要点： 1. 揭示了色谱峰扩张、柱效降低的原因：被分离组分分子在色谱柱内运行的多路径、浓度梯度所造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素。 2. 提出了提高柱效的措施：通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效。 影响分离度的因素 A B B A B B A A 原始 状态 增加 k 增加 n 增加α 影响分离度的因素 在保持色谱条件不变的情况下，从分离度方程式可以推导出柱长与分离度的关系式 * 气相色谱法与高效液相色谱法 一、气相色谱法的特点 1、选择性好； 2、柱效高； 3、灵敏度高。 二、气相色谱仪 1、气路系统 2、进样系统 3、分离系统 4、温控系统（恒温和程序升温） 5、检测记录系统 热导池(TCD)、电子捕获(ECD) 氢火焰(FID)、火焰光度(FPD) * 热导池检测器(TCD)：对所有物质均有响应；灵敏度适中； 氢火焰电离检测器(FID)：对大多数有机物有很高灵敏度； 电子俘获检测器(ECD)：对具有电负性物质（如卤素）的检测 有很高灵敏度； 火焰光度检测器(FPD)：对含硫、磷化合物具有高选择性和高 灵敏度。 * 三、气相色谱流动相与固定相 1、流动相（载气）：H2, N2, Ar, He 2、固体固定相： 3、液体固定相：载体 固定液 理想的固定液 (1) 有适当溶解性能； (2) 选择性好； (3) 挥发性小； (4) 热稳定性好； (5) 化学稳定性好 具体考虑如下： （1）对非极性组分：一般选择非极性固定液 出峰顺序：按沸点由低到高 （2）中等极性组分：选中等极性固定液 出峰顺序：沸点差别大，按沸点出峰；沸点差别小，按极性大小出峰 选择固定液的方法：相似相溶 （3）强极性：选择强极性固定液 出峰顺序：按极性大小出峰 （4）混合物：极性 出峰顺序：先非后极 * 四、定性与定量方法 1、定性分析 (1) 利用保留值定性 (2) 利用保留值经验规律定性 (3) 根据文献保留数据定性——保留指数定性法 * 2、定量分析 (1) 归一化法 (2) 内标法 (3) 外标法（标准曲线法） * 高效液相色谱法 (High Performance Liquid Chromatography, HPLC) 一、高效液相色谱法的特点： 1、适合于分离生物大分子，不稳定的天然产物，离子型化合物以及高沸点的高分子化合物； 2、液相色谱中的流动相可选用多种多样的不同极性的液体； 3、高效液相色谱法在室温条件下工作，并可对分析样品回收和纯化制备。 * 二、高效液相色谱仪 1、高压输液系统 2、进样系统 3、分离系统 4、检测系统 5、数据处理系统 紫外光度检测器示差折光检测器荧光检测器电化学检测器 * (1) 紫外吸收检测器 具有灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度不敏感等特点，它是液相色谱最常用的检测器。在实际工作，紫外检测的主要参数是选择检测波长，它应考虑溶质和流动相的吸收特性。  (2) 荧光检测器 荧光检测器是一种很灵敏的, 有选择性的检测器, 其灵敏度比UV 高10~1000倍, 一般可测ppb级的化合物。它用于检测物质本身具有荧光或为了提高灵敏度将无荧光的物质衍生成荧光体。 * (3) 电化学检测器 对于具有电活性的物质, 在液相色谱中可采用电化学检测器检测。 它包括电导库仑、安培、极谱、电位和光电导等形式。 (4) 示差折射检测器 示差折射检测器是通过连续监测参比池和测量池中溶液的折射率之差来测定溶质浓度。由于折射率是物质的通用性质，示差折射检测器是一种通用型的整体性质检测器。