生物化学实验:微量凯氏定氮法.pptVIP

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  • 2017-11-29 发布于湖北
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生物化学实验:微量凯氏定氮法

实验内容 一、目的和要求 二、实验原理 三、方法步骤 四、思考题 天然有机物(如蛋白质、核酸及氨其酸等)的含氮量用凯氏定氮法来测定。当天然含氮有机物与浓硫酸共热时,分解出氮、二氧化碳及水。氮转变出的氨与硫酸化合生成硫酸铵。分解反应进行得很慢,可加入硫酸铜及硫酸钾或硫酸钠促进之,其中硫酸铜为催化剂,硫酸钾或硫酸钠可提高消化液的沸点。氧化剂过氧化氢也能加速反应。 测定某一固体样品中的含氮量,是按100克该物质的的干重所含的氮克数来表示(%)。因此在定氮前应先将固体样品中的水分除掉。操作时先将样品磨细,在称量瓶中称入一定量的样品,再置于105℃的烘箱内烘烤1小时。用坩埚钳将称量瓶放入干燥器内,待降至室温后称重。按上述操作,每烘干1小时后重复称量一次,直至两次称量数值不变,即达到恒重为止。 用量筒向小玻杯加入10mL 40%氢氨化钠,加完后,轻轻地旋转着向上提起棒状玻塞,使碱液慢慢流入反应室,在碱液尚未守全流入时,将玻塞盖紧,向小玻杯中加入约5mL蒸馏水。再轻提玻塞,使一半蒸馏水流入反应室,另一半留在玻杯中水封。 预祝同学们 实验成功! 生物化学实验 微量凯氏定氮法 一、目的和要求 1. 学习微量凯氏定氮法的原理 2. 掌握微量凯氏定

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