靶向奶牛lepr基因的mir-30d报告基因载体构建及靶向验证 construction of dairy cow lepr targeting mir-30d reporter gene vector and verification of its targeting.pdfVIP

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2017-11-30 发布于上海
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靶向奶牛lepr基因的mir-30d报告基因载体构建及靶向验证 construction of dairy cow lepr targeting mir-30d reporter gene vector and verification of its targeting.pdf

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靶向奶牛lepr基因的mir-30d报告基因载体构建及靶向验证 construction of dairy cow lepr targeting mir-30d reporter gene vector and verification of its targeting

v，、^，w．chinadairy．net 中国乳品工业 zgrpgy@1163．com 酲airy mitL-30d)t f-Ill，接晶，高学军，李庆章 (东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨150030) 与重组荧光素酶载体质粒共转染后的细胞裂解液进行荧光素酶活性检测分析。结果表明，靶向奶牛伽，基因的miR一30d荧光素酶表达奠定实验基础。关键词：Lepr；mitL一30d：报告基因中图分类号：q936 文献标识码：A 文章编号：1001—2230(2011)05—0004—03 Constructionof COW miR‘_‘30d vectorandver- reporter dairy Leprtargeting gene ificationofits targeting MEN Jing，JIEJing，GAOXue-jun，LIQing—zhang Science of of 1 (The Dairy LaboratoryMinistryEducation，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin Key Abstract：Toestablishluciferasevectorof COW I皿一30d，andidentify isa ofmill一30dindairy reporter amy Leprtargeting if却rtargetgene COW luciferase vectorwasrebuiltwitllthe couldcombine丽t11nR一30d．The mammary出nd．Theexpressionreporter sequencewhich工印r in and ceUswhichmiR一30dandtherebuiltvectorwerecotransfectedwere theluciferaseWasdetected．Thehiciferaseex- fragmentated activity vectoris constructured isa ofmiP．一30d．Thisestablishesthe foundationfor pressionreporter successfully，／2prtargetgene study experimental boththeinteractionbetweennliR一30d andthe ofmit≈一30donthe networkassociated、析d1 and／-’pr regulation biological Lepr． Keywords：LepnmjR一30d；reporter gene 0 引言 1材料与方法 1．1材料 MicroRNA(miRNA)是一类参与基因转录后调控的内源性非编码小RNA旧．其通过对靶m11NA的切割1．1．1 主要试剂或翻译抑制来下调目的基因表达【3】。瘦素受体(LEPR．) Trizol、Lipofectamine