实验七 霉菌的形态观察
实验七 霉菌的形态结构观察 一、目的要求 观察霉菌的菌落特征 观察霉菌个体形态及各种无性 孢子的形态 掌握霉菌的制片方法 二、基本原理 霉菌的营养体是分枝的丝状体 有隔菌丝——有横隔膜 无隔菌丝——无横膈膜 霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,且孢子 容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉 溶液,菌丝和孢子染成蓝色,保持菌丝体圆 形,使细胞不易干燥,并有杀菌作用 菌种:产黄青霉、黄曲霉、黑根霉 溶液与试剂:乳酸石炭酸溶液 仪器和其它物品:载片、盖片、显微镜、 接种环等 三、实验器材与试剂 直接制片观察法 于洁净的载片中央,滴加一小滴乳酸石炭酸溶液 用镊子从黑曲霉或黑根霉马铃薯琼脂平板中取少许 菌丝先放入50%乙醇中浸一下,洗去脱落的孢子 然后置于染液中,用解剖针小心将菌丝分开,去掉 培养基,盖上盖玻片,用低倍镜和高倍镜镜检 四、操作步骤 透明胶带法 滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染液于载玻片上 用食指与拇指黏在一段透明胶带两端,使透明胶带 呈U形,胶面朝下,如下图 将透明胶带胶面轻轻触及黑曲霉或黑根霉菌落表面 将黏在透明胶带上的菌体浸入载玻片上的乳酸石炭 酸棉蓝染液,并将透明胶两端固定在载玻片两端, 用低倍镜和高倍镜镜检 载玻片培养观察法 培养小室准备及灭菌:在平皿皿底铺一张略小于皿底的 圆滤纸片,上面放一U型玻棒,在U型玻棒上放一块载玻片和两块盖玻片,盖上皿盖,于121℃灭菌30 min ,烘干备用 琼脂块制备:通过无菌操作,用解剖刀由马铃薯琼脂薄层平板上切下 1cm2 左右的琼脂块,将其移至培养小室的载玻片上,每片两块 接种:挑取少量孢子,接种于培养小室中琼脂块边缘上,将盖玻片覆盖在琼脂块上 培养:在培养小室中圆滤纸片上加3-5ml灭菌的20%甘油(用于保持湿度),盖上皿盖,于28℃培养。 镜检:根据 需要于不同 时间取出载 玻片进行镜检 青霉 附:霉菌菌落的观察 青霉的显微结构 曲霉 曲霉的显微的显微结构 根霉 根霉显微形态 五、实验结果与讨论 请在实验报告上汇出观察到的霉菌形态 细菌、放线菌、霉菌菌落特征如何识别
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