第七章 病毒(下).pptVIP

呼肠孤病毒侵入与脱壳 4：生物合成 病毒大分子的生物合成： 病毒基因组各不相同，其复制形式亦有多种。病毒基因组的转录是分期进行的。 发生在病毒核酸复制以前的转录为早期转录。 在病毒核酸复制开始或复制后所进行的转录为晚期转录，晚期基因编码的晚期蛋白主要是构成子代毒粒所需的结构蛋白。 如双链DNA噬菌体的增殖过程。 双链ＤＮＡ噬菌体通过三阶段转录的增殖过程 不同类型病毒mRNA的转录 病毒分组法则 mRNA I. dsDNA IIa. (-)ssDNA IIb. (+)ss DNA VI. ssRNA IV. (+)ssRNA V. (-)ssRNA III. dsRNA VII. ds/ssDNA 蛋白质 1. 双链DNA病毒 复制位置：多在细胞核内进行（利用核内的酶系） 除了痘病毒 复制分阶段 后一阶段依赖于前一阶段的完成 表达水平逐级放大 dsDNA mRNA 极早期 调控蛋白、酶 子代DNA mRNA 早期 (酶、调控、结构蛋白) mRNA 晚期 结构蛋白 子代病毒 ssDNA mRNA 病毒蛋白 (酶、调节、结构蛋白) 子代 ssDNA 子代病毒 dsDNA 细胞蛋白 2. 单链DNA病毒 复制位置：细胞核中复制 高度依赖细胞因子 形成dsDNA中间体 复制阶段不明显 病毒蛋白 (酶、调节、结构蛋白) 子代 dsRNA 子代病毒 +ssRNA(mRNA) 初级 转录 dsRNA-病毒酶 次级 转录 ssRNA-病毒酶 3. 双链RNA病毒 复制位置：细胞质 病毒粒子带有依赖dsRNA的RNA多聚酶酶 病毒不完全脱壳，初级转录在其中进行 ssRNA(mRNA)与病毒蛋白形成新的病毒颗粒 在新的病毒颗粒中再形成子代dsRNA Cap AAAA 加工 A Cap AAAA 复制酶 Cap AAAA Cap AAAA 结构蛋白 转录 B 4. 正链RNA病毒 基因组本身就可作为mRNA 复制位置：细胞质 两类复制方式： 合成一个多聚蛋白，再切割为成熟蛋白，行使功能 分两步转录，先合成复制酶，再由该酶合成亚基因组片段，合成其它蛋白 正链RNA病毒 子代病毒 -ssRNA 多聚蛋白 +ssRNA +ssRNA 初级表达产物 病毒蛋白(酶、调节、与结构蛋白) 蛋白酶 亚基因组mRNA 次级表达产物 A B 5. 负链RNA病毒 复制位置：细胞质 首先依赖病毒粒子中携带的酶转录形成mRNA 分两类： 分段基因组：每个片段分别转录成mRNA，合成蛋白，并作为模板合成子代基因组 (-) (+) 病毒蛋白 A (-) (+) 病毒蛋白 B 不分段基因组：由病毒的转录酶合成单个基因的mRNA 病毒蛋白 (酶、调节、结构蛋白) 子代-ssRNA 子代病毒 -ssRNA 病毒酶 mRNA 蛋白 mRNA 双义编码 负链RNA病毒 复制位置：细胞核 虽是正链RNA，但不作为mRNA，而是先反转录形成dsDNA——原病毒 病毒带有反转录酶，在不完全脱壳的病毒颗粒中进行反转录 原病毒DNA整合到染色体，与染色体一起复制、转录 转录产物既是mRNA，又是子代基因组 病毒蛋白 (酶、调节、结构蛋白) mRNA 子代病毒 dsDNA原病毒 反转录 (+)ssRNA-病毒反转录酶 6. 有DNA中间体的正链RNA病毒（RNA反转录病毒） 复制位置：细胞核 复制过程类似双链DNA病毒 子代基因组不是直接由DNA复制而来，而由mRNA经反转录而来 病毒蛋白 (酶、调节、结构蛋白) mRNA 子代病毒 dsDNA闭环 修补 dsDNA(带缺口) dsDNA(带缺口) 反转录 7. 有RNA中间体的DNA病毒（DNA类反转录病毒） 5：装配与释放 装配与释放：病毒的装配部位取决于基因组的复制部位和有无包膜。除痘病毒外，DNA病毒的核衣壳都在细胞核内装配，通过核膜或细胞膜获得包膜，痘类病毒和RNA病毒的核衣壳在胞质内装配，但流感病毒在核内装配。 包膜装配发生在细胞膜上，并以芽生方式释放病毒。无包膜病毒在细胞质中装配后溶解细胞释放病毒。 病毒的复制周期 吸附 侵入 宿主细胞功能 装配 (成熟) 转录 基因组复制 释放 脱壳 转译 I I ．病毒的一步生长曲线 通过组织培养的细胞可以分析这个复制周期的过程，一般称这个过程为一步生长周期，此周期是由一系列的步骤组成的，包括吸附和进入、核酸合成和转录、蛋白质合成、成熟、装配和释放。 在病毒感染细胞后的不同时间，测定感染性病毒，以时间为横坐标，病毒的数量为纵坐标，绘制获得一步生长曲线。 一步生长曲线 实验设计依据：1个菌体被1个噬菌体感染,避免二次吸附；细菌群体被噬菌体同步感染。 实验过程: 敏感菌10ml