激光人工辅助孵化技术-不孕不育治疗.ppt

激光人工辅助孵化技术(Laser Assisted Haching) 体外受精-胚胎移植(1) 超促排卵，监测卵泡，得到较多成熟卵子 体外受精-胚胎移植(2) B超声下穿刺取卵 体外受精-胚胎移植(3) 人工取精及精液处理 体外受精-胚胎移植(4) 实验室中将精子卵子放在一起，或通过显微注射使卵子受精 体外受精-胚胎移植(5) 受精卵培养 体外受精-胚胎移植(6) 内膜监测和准备 体外受精-胚胎移植(7) 将受精卵通过宫颈送入子宫 各国IVF－ET平均妊娠率 移植胚胎数目与妊娠率的关系 影响妊娠率的主要因素 促排卵方案：可以进行优化调整 实验室条件：国内已经处于国际先进水平 着床：影响因素众多 胚胎着床能力 透明带 内膜容受性 了解甚少 透明带状态与妊娠 研究表明：随妇女年龄增大 透明带厚度加厚 透明带硬度增加 国内外文献报道：透明带厚度（ZTP）和透明带厚度变量（ZTPV）与胚胎种植率和妊娠率密切相关 较大年龄妇女应选择辅助孵化 人工孵化（AHA，Assisted Hatching） 适应症 基础FSH偏高 卵子年龄高 透明带偏厚、硬 前次IVF不成功 可移植胚胎数目少 方法 将透明带部分开口，以利于胚胎种植 酸化法：以酸液－Acidic Tyrode’s Solution 腐蚀透明带 酶消化法：以Pronase消化使透明带变薄 透明带部分切割法（Partial Zona Dring, PZD） 激光透明带切割(Laser Assisted Haching, LAH) 酸化法和酶消化法人工孵化 激光辅助人工孵化（LZD） 利用激光高度聚焦，能量集中的特点，在透明带上进行显微切割 以往的激光设备的不足 能量不够大 每次击发时间长 热效应作用范围大 易损伤卵裂球 切割方式 某些文献报道激光人工孵化对妊娠率无改善 激光辅助人工孵化的发展 二极管激光，单一波长1480nm 染色体吸收少 水中吸收大 对细胞损伤降至最低 激光辅助人工孵化的发展 能量不断提高 动物研究显示对细胞影响小的激光要求（J Biomed Opt 2001 ;6:205） 能量大于100mW 作用时间小于5ms 聚焦能力不断加强 热效应范围不断缩小 对胚胎更加安全 激光辅助人工孵化的发展 激光安全等级更高 美国国家激光安全协会认定 欧洲CE认定 对操作者更加安全 激光辅助孵化方法的改进（1） 透明带部分切开（Partial Dissection） 激光辅助孵化方法的改进（2） 透明带完全切开（Total Dissection） 激光辅助孵化方法的改进（3） 部分透明带削薄（Quarter Zona Thinning） 优于其他方法 （Hum Reprod 2001;16:2182） 文献报道 激光辅助人工孵化（LAH）优于酸化法人工孵化（Feril Steril 2002;78:179） 透明带烧灼激光系统 能量更高 激光中心220mW 到达目标180mW 作用时间更短 高档为1.5ms 中档为1.0ms 低档为0.5ms 透明带烧灼激光系统 聚焦更精确 作用范围更集中 对细胞损伤更小 激光辅助孵化的应用 协和医院高龄、疑难患者占较大比例 应用于IVF或ICSI后共25例 其中年龄36岁、基础FSH10miu/ml、有子宫肌腺症或只有1个可移植胚胎者12例（48%） 妊娠6例 共进行单个胚胎移植6个周期 马×× 38岁 继发不育3年 自然流产后刮宫及宫外孕各一次 早卵泡期激素水平： 第一次尝试（2002年5月） 短方案 Hp－FSH 300IU起始剂量 用药6天，仅有1个卵泡发育 卵泡18.7mm时予HCG10000IU 取卵前卵泡自然破裂 第二次尝试（2002年10月） 短方案 起始剂量： 果纳芬（基因重组FSH）300IU 2～3卵泡发育，优势卵泡14mm时加用HMG 优势卵泡21mm时予HCG10000IU 取卵2个，一个MII期 受精后Day3发育成2PN Day3达到2细胞，行激光透明带穿孔后ET 移植后14天血HCG61miu/ml 移植后40天B超示单胎，可见胎芽、胎心 用途二：胚胎活检（Embryo biopsy） 激光辅助人工孵化 简便易行 对胚胎安全 可以广泛应用 大大提高种植率 增加妊娠率 减少移植胚胎的数目 减少多胎率 透明带烧灼激光系统 激光发生器 最外圈为50 °C 是 LAH I 4 27 张×× 6 否 LAH II 4 42 曹× 5 是 LAH II 2 38 马×× 4 否 PZD II 4 32 马丽× 3 否 PZD III 4 27 省×× 2 否 无 III 4 31 贾×× 1 是否 妊娠 人工孵化方法 胚胎 级别 胚胎 卵裂数 年龄 姓名 36.37 3.29 13.26 E2 (pg/m