禾谷丝核菌原生质体的制备及遗传转化体系的探索.pdfVIP

江苏农业学报(Jiangsu．，．ofAgr．Sci．)，2013，29(6)：1313—1319 http：／／www．Jsnyxb．corn 任向荣，李 伟，孙海燕，等．禾谷丝核菌原生质体的制备及遗传转化体系的探索[J]．江苏农业学报，2013，29(6) doi：10．3969／j．issn．1000-4440．2013．06．020 禾谷丝核菌原生质体的制备及遗传转化体系的探索 任向荣 ， 李 伟 ， 孙海燕 ， 陈一t；~g-2， 于汉寿 (1．南京农业大学生命科学院，江苏 南京 210095；2．江苏省农业科学院植物保护研究所 ，江苏 南京 210014) 摘要：禾谷丝核菌侵染小麦引起的纹枯病是一种严重的土传病害，已成为 中国小麦高产稳产的重要威胁。 为进一步开展禾谷丝核菌的致病机理等研究，通过对酶种类、菌丝酶解时间及渗透压稳定剂等因素进行原生质体 制备条件的优化，进一步尝试了PEG-原生质体转化和土壤农杆菌介导的转化方法进行禾谷丝核菌的转化。建立 了禾谷丝核菌高效、稳定的原生质体制备体系，通过形态学、生长速率及致病性的比较发现原生质体再生菌株和原 始菌株之间差异不显著。多次尝试两种转化方法，没有获得禾谷丝核菌的遗传转化子。原生质体制备体系的获得 为禾谷丝核菌遗传转化、原生质体融合等体系的建立奠定了基础。 关键词：禾谷丝核菌 ；原生质体；再生菌株；遗传转化 中图分类号： $435．12 文献标识码：A 文章编号： 1000-4440(2013)O6—1313-07 Protoplastpreparation andgenetictransformationofRhizoctonia cerealis REN Xiang．rong，， LIWei， SUN Hai．yan ， CHEN Huai．gu ， YU Han．shou (1．CollegeofLfieSciences，Na AgriculturalUniversity，Na ng210095，China；2．InstituteofPlantProtection，JiangsuAcademyofAgricultural Sciences，Nanjing210014，China) Abstract： Wheatsharp eyespotcausedbyRhizoctoniacerealisVanderHoeven，isasoil—bornedisease，whichhas significantlythreatenedthehig【handstableproductionofwheatinChina．InordertostudythepathogenesisofR．cerealis， theenzyme，theenzymolysistimeandtheosmoticstabilizerforprotoplastpreparationwereoptimized．TwomeansthePEG— protoplastandAgrobacteriumtumefaciensmediationwereemloyedtotransformR．cerealis．Anefficientandstablesystemof protoplastpreparationforR．cerealiswasdeveloped，andtherewasnodifferencebetweenregeneratedstrainsandoriginal straininmoprhology，speed ofgrowthandpathogenicity．Notransformantwasobtainedbybothmethods．Theprotoplast preparationsystem ofrR．cerealisprovidedabasisofrgenetictransformation，protoplastfusionandSOon． Keywords： Rhizoctoniacerealis；protoplast；regeneratedstrain；genetictransformation 由禾谷丝核菌(RhizoctoniacerealisVanderHo- 麦高产、稳产的重要威胁 ¨。J。该菌通常以菌丝和菌 even)引起的小麦纹枯病已成为中国小麦主产区小