细胞学-第三章 植物细胞培养应用1.pptVIP

2）人工胚乳 人工胚乳：由供应胚状体生长发育的多种营养物质组成，养分包括矿质元素、维生素、碳源以及激素等。人工胚乳（培养基）为体细胞胚进一步发育提供的各种必需营养物质。 目前采用较多的是在海藻酸钠溶液中加入MS培养基，其中含有大量元素、微量元素、有机物质等基本成分。 还可以向人工胚乳中加入各种不同的物质，如植物激素、杀虫剂、除草剂等。 3）人工种皮 人工种皮具有保护作用。能够象天然种皮一样在适宜条件下维持胚状体正常的生长发育。 它既可保证种子内水分和营养免于丧失，又能保证良好透水透气，防止外部机械冲击的压力。 人工种子的制备方法 ★目前研究和应用较多的包埋基质是水溶性的海藻酸钠，成株率较高 ★用该法包埋的苜蓿人工种子，发芽率为86％ 采用NaNO3、(NH4)SO4或尿素作氮源时，螺旋藻产量为25.0mg/ml,而不加氮源时仅为2.61mg/ml. Na+和K+都是螺旋藻生长所必需的元素，此外磷酸盐、N/P和微量元素对螺旋藻的生长均有一定影响。 螺旋藻生长的最适pH为8.5～10.5，最适温度为28～35℃，最适生长光照为30～35klx。 (三)紫草细胞培养生产紫草宁 ●紫草为药典收载临床常用传统中药，富含紫草宁及其衍生物，有活血、解毒、抗肿瘤、抗病毒、消炎等作用，可治疗烧伤、皮肤溃疡、皮肤癌等。 2，4－萘醌类化合物 ●紫草宁又名紫草素，化学式；C16H16O5 ●具有金属光泽的棕红色结晶。溶于有机溶剂。 ●PH值6.1时为红色，PH值为8.8时为紫色，PH值为10.0时为蓝色。 ●紫草宁因其色泽鲜艳，附着力强被国际誉为“红色素之王”， ●可作为保健食品、保健饮品、保健化妆品的添加剂， ●可以作为化妆品口红、胭脂、粉饼的染料 ●食品的饮料、熏肉、医药胶囊等着色剂 ●国际市场价（精品干粉）每公斤价格为5000-7000美元。 ●由于人工栽培紫草难以成活，为了弥补野生资源的不足，已广泛采用以紫草细胞的离体培养来生产紫草宁。 ●1982年日本已采用大规模植物细胞培养技术进行紫草宁的生产。 紫草细胞悬浮培养的动力学  （浙江大学化工系） ●固体培养基上培养25天的细胞接种于液体培养基中，于26oC黑暗条件下，在 70 r/min的摇床上培养，培养周期为17天。 1.细胞生长 ●紫草细胞培养过程的细胞干重与细胞结构性组分（指细胞中不溶于水的部分，如细胞壁及膜结构）的变化 2、氮源 3、磷酸盐 4 金属元素 10升气升环流式生物反应器培养色素 （中国科学院华南植物研究） 南京大学曹日强成功建立了紫草细胞组织培养固定化系统（细胞与海藻酸钠（5％）以l：l混匀后，滴入含 CaCl2 0.lmol／L的迅培养液，静置)30 min。 (四) 人工种子的制备 人工种子（artificial seeds）技术是20世纪80年代中期兴起的一项高新生物技术。它最早是由美国生物学家T. Murashing于1978年在国际园艺植物学术会议上提出的. 国外，已研制成胡萝卜、苜蓿、芹菜、花椰菜、莴苣、花旗松、天竺葵等植物的人工种子。 我国继1988年在国际上首次研制成功水稻人工种子后，近年来又研制成了旱芹、花椰莱、甘薯和魔芋等许多种作物的人工种子，并培育出一批性状稳定的种苗。 我国在这方面的研究位于世界前列，北京大学、中国科学院遗传研究所、西南农业大学、西南师范大学等在胡萝卜、马铃薯、苜蓿、芹菜、魔芋、及水稻等作物的人工种子的制作技术及生理生化的研究方面取得了重要的进展。 人工种子的概念和基本结构 1、 概念 人工种子是模仿天然种子结构，制造出来的生命有机体，它能象种子一样萌发再生并长成植物。 人工种子的制造利用了细胞的全能性，将离体培养所产生的体细胞胚包裹在一层含有营养物质并具有保护功能的外膜内，在适宜条件下能够发育成完整植株。 与普通的试管苗相比，人工种子具有可自动化批量生产、运输方便、可直接播种、发芽和生长发育比较整齐等优点。 2、基本结构 人工种子主要由 胚状体 人工胚乳 人工种皮构成。 1）胚状体 人工种子的核心“部件”， 是一个被外层营 养物包埋的具有 类似种胚功能的 胚状体，相当于 天然种子的胚 合子胚）。 胚状体发生方式 来源于外植体的表皮细胞：由外植体表皮细胞分裂而形成胚状体。芹菜由下胚轴表皮细胞形成大量胚状体。 来源于愈伤组织细胞：由愈伤组织发生胚状体的植物很多，如玉米、西洋参、猕猴桃等。 悬浮培养中由单细胞来源的胚状体，如胡萝卜、芹菜等. 由花药花粉培养产生的单倍体胚状体，如曼陀罗、烟草、青椒、茄子等。 来源于原生质体的胚状体，如玉米、黄瓜。 三 植物细胞培养应用研究 (一)紫杉醇 ( Taxol) Cancer killer ●1978年,Susan