排硫硫杆菌D6中硫化氢脱氢酶的纯化及性质.PDFVIP

微生物学通报 APR 20, 2011, 38(4): 547−554 Microbiology China © 2011 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 排硫硫杆菌 D6 中硫化氢脱氢酶的纯化及性质 * 李咏兰 邱广亮 吕桂芬 王忠魁 张明斗 李斌 ( 内蒙古师范大学 生物工程研究中心 内蒙古 呼和浩特 010022) 摘 要: 从烟气生物脱硫系统的好氧产硫磁性稳态流化床反应器中, 经反复纯化分离出脱硫优势 菌排硫硫杆菌菌株 D6, 采用四步工艺纯化出膜结合型硫化氢脱氢酶。SDS测定显示其由 α β 亚基组成, 光谱分析表明含有 1 mol FAD/mol 酶, 血红素染色揭示小亚基上结合有 1 mol 血红 1 1 素 c/mol 酶, 该酶属于氧还蛋白家族。该酶的最适pH 为 8.6, 对马心细胞色素 c 和硫化物的表观 Km 分别为2.5 µmol/L 和6.1 µmol/L, 反应计量实验表明其氧化产物为元素硫。硫化氢脱氢酶受到 硫和亚硫酸盐的抑制, 100 µmol/L 的氰化钾对该酶抑制率达72% 。 关键词: 硫化氢脱氢酶, 排硫硫杆菌, 硫化氢氧化, 硫代谢, 烟气生物脱硫 Purification and characterization of hydrogen sulfide dehydrogenase from Thiobacillus thioparus D6 * LI Yong-Lan QIU Guang-Liang LV Gui-Fen WANG Zhong-Kui ZHANG Ming-Dou LI Bin (Center of Biotechnology, Inner Mongolia Normal University, Hohehot, Inner Mongolia 010022, China) Abstract: A novel membrane-bound hydrogen sulfide dehydrogenase was purified to homogeneity by a four-step procedure from Thiobacillus thioparus D6, an neutrophilic, obligately chemolithoautotrophic bacteria obtained from aerobic magnetic stabilized fluidized bed reactor of flue gas biodesulfurization system. The natural hydrogen sulfide dehydrogenase had a molecular mass of 95 kD and comprised two subunits named α and β with molecular masses of