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毛竹阿拉伯糖5磷酸异构酶的基因克隆原核表达-浙江农林大学学报
浙 江 农 林 大 学 学 报
毛竹阿拉伯糖 磷酸异构酶的基因克隆 原核表达及纯化
屈亚平 张智俊 王超莉 王 蕾 吴林军
浙江农林大学 亚热带森林培育国家重点实验室培育基地 浙江 临安
摘要 毛竹 阿拉伯糖 磷酸异构酶 是 酮 脱氧辛糖酸 生物合成途径的第 个
关键酶 采用逆转录实时聚合酶链式反应 克隆得到毛竹 基因 该基因 全长 编码
个氨基酸 对不同物种来源的 氨基酸序列进行比对和系统进化树分析 结果表明 毛竹的 与玉米
等植物来源的 有很高的序列一致性 而与微生物来源的 序列一致性较低 毛竹不同组织实时
荧光定量聚合酶链式反应 结果表明 基因在叶中表达量远远高于其他组织 在大肠埃希菌
原核表达系统中获得了 的可溶性高表达蛋白 将大量表达的重组蛋白经过 亲和层析和
分子筛层析 进行纯化 发现 在溶液 三羟甲基氨基甲烷 氯化钠 中以
多种聚体的形式存在 酶学性质测定的结果表明 毛竹 酶最适 值为 最适作用温度为 此结
果为后期研究植物 蛋白的结构与功能奠定了基础 图 参
关键词 林木育种学 毛竹 阿拉伯糖 磷酸异构酶 基因克隆 原核表达 蛋白纯化
中图分类号 文献标志码 文章编号
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