现代农业仪器分析 课件4章紫外可见.ppt

第四章 紫外/可见光谱法 基本要求 了解有机化合物分子的电子跃迁类型 掌握紫外/可见光谱和有机化合物结构的关系 掌握紫外/可见光谱用于单组分体系和多组分体系的定量测定方法 理解紫外－可见吸收光谱法的测量误差与分光光度计的性能的关系 §4.1 紫外/可见光谱法基本原理  紫外/可见吸收光谱法研究200－800nm光谱区域内的分子吸收光谱，近年来，光源的工作范围扩展到185－1000nm。 测量吸光物质对紫外/可见光的吸收程度进行物质含量的测定。 利用物质的光谱特征推测物质的组成和结构。 一、紫外可见吸收光谱 二个问题： 二、吸收光谱与分子结构 ① 形成单键的σ电子 ② 形成双键的π电子 ③ 未参与成键的孤对n电子 可能发生的 6 种跃迁方式 σ→σ* 跃迁: 饱和烃发生σ→σ*的跃迁。跃迁吸收的能量最大，辐射波长 200nm。如：己烷、庚烷、环己烷等，常作为溶剂。 n →σ*跃迁: 发生在含杂原子的饱和烃中。所需能量小于σ→σ* 跃迁，在150～250nm紫外区有中强度吸收，ε在102～103 L·mol-1·cm-1范围内，跃迁概率较小。如：CH3－X ：。 π→π*跃迁： 发生在含双键或三键的不饱和烃中。在200nm附近有强吸收，ε在103～104 L·mol-1·cm-1。共轭体系中π→π*跃迁吸收波长在200~700nm谱域内。如：C=O、C=C、―C≡C― 等。 三、有机化合物的紫外吸收光谱 只有σ电子，产生σ→σ*跃迁。 助色团取代时产生n→π*跃迁，吸收峰红移。 n→π*跃迁的能量取决于杂原子的性质。 孤立双键产生π→π*跃迁，200nm处有强吸收。 双键上的碳被杂原子取代，产生n→π*、π→π*、n→σ*跃迁，λmax与杂原子有关。 组成双键或三键的原子种类对λmax影响不大。 共轭烃的吸收波长红移，吸收强度增强。 共轭体系越长， λmax 红移的越显著，共轭双键数目 5时，吸收带落在可见光区。 C=O产生n→σ*、n→π*和π→π*吸收带。 π→π*吸收带在近紫外或紫外光区；醛、酮的n→π*吸收带在270～300nm，强度低，εmax为10～20 L·mol-1·cm-1，而且谱带宽。 醛、酮与双键共轭形成α,β-不饱和醛酮。使π→π*吸收带红移至220～260 nm，吸收强度增大，εmax～104 L·mol-1·cm-1；n→π*吸收带移至310～330 nm，强度降低，εmax102 L·mol-1·cm-1。据此识别α，β-不饱和醛酮。 苯环三个双键共轭产生 E 带。 π→π* 跃迁与苯环振动叠加产生精细结构 B带，是芳香族化合物的特征吸收。 苯环有取代 基存在，精细 结构消失形成 宽吸收带，吸 收强度增加， 吸收波长红移。 四、影响紫外光谱的因素 五、紫外/可见光谱在有机物 结构鉴定中的应用 在相同测量条件下，比较待测物与标准样品的吸收光谱图，根据吸收光谱的形状、吸收峰数目、λmax 和εmax 进行定性鉴定。 在没有标准品的情况下，借助于汇编的标准谱图或电子光谱数据表相比较。 §4.2 紫外/可见光谱法定量 分析方法 根据吸光物质对紫外/可见光的吸收程度进行物质含量的测定 一、光谱定量基础 二、定量分析方法 三、定量分析的准确度和灵敏度 四、分析条件的选择 一、仪器基本构成 二、仪器类型 1.透射率和吸光度 I0 It Ia 忽略 Ir Ir 以吸光度 A 表示物质对光吸收程度，并规定 A 等于透光度的负对数。 根据Lambert－Beer定律：一束平行单色光垂直通过均匀吸光介质，透过光强度随介质厚度及吸光物质浓度增加按指数规律递减。 It＝I0e－k b c T＝10－k b c A＝－log T ＝－log10 k b c ＝k b c AT=A1+A2+A3+…+An= b(k1c1+k2c2+ …+kncn) 吸光度具有加和性 当吸光物质浓度很低时，测得 A 值很小，可以用“吸收值α”代替 A 。 定义：介质吸收的光强度占入射光强度的比率。 α＝（I0－It）/I0＝1－T 由于：T＝10－A＝e－2.3 A 当A0.08，e－2.3A＝1－2.3A－2.3A2－2.3A3－┄ ＝1－0.184－0.0147－┄ 所以： e－2.3 A＝1－2.3A 代入α＝1－T 式 得到： α＝2.3 A 在低浓度范围内，α与吸光物质的浓度成正比。 2.引起偏离Beer定律的因素 B