番茄dxs基因的克隆及在大肠杆菌中的颜色互补.PDFVIP

园　艺 　学 　报 　2007 , 34 (2) : 371 - 376 A cta Horticu lturae Sin ica 番茄 dxs基因的克隆及在大肠杆菌中的颜色互补 1 1 2 1 潘夕春 , 陈　敏 , 刘 　颜 , 廖志华 (1 西南大学生命科学学院 , 三峡库区生态环境教育部重点实验室 , 重庆市甘薯研究中心 , 重庆 4007 15; 2 重庆师范大 学化学学院 , 重庆 400047) 摘 　要 : 用 R T - PCR (反转录 - 聚合酶链式反应 ) 的方法从番茄中克隆到 5 - 磷酸脱氧木酮糖合成酶 (D eoxyoxylu lo se5pho sphate syntha se, DXS) 基因编码区 (记为 ledxs) , 并构建了 ledxs 原核表达载体 p Tr cL eDX S。将携带番茄红素生物合成途径上香叶基香叶基焦磷酸合成酶 ( geranylgeranyl p yrop ho sphate syn thase, crtE) , 八氢番茄红素合成酶 (p hytoene syn tha se, crtB ) , 八氢番茄红素脱饱和酶 ( phytoene de satu ra se, crt I) 3个关键酶基因的原核表达载体 pACLYC转入大肠杆菌 XL 1B lue。将 p TrcL eDXS转入该重组工 程菌 , 获得番茄红素工程菌 。将该菌用于构建颜色互补平板 , 并进行发酵培养以检测番茄红素表达量 。颜 - 1 μ 色互补平板上的菌斑呈现鲜艳的红色 。经过 2 1 h 的培养番茄红素的产量达到 60525 g ·L 。结果显示 : ledxs能明显推动类胡萝 卜素途径向番茄红素合成的方向流动 。 关键词 : 番茄 ; 5 - 磷酸脱氧木酮糖合成酶 ; 克隆; 番茄红素 ; 颜色互补 ; 发酵 中图分类号 : S 64 12　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2007) 02 037 106 C lon ing of D eoxyoxy lulose5phospha te Syn tha se Gene from Tom a to and Its Color Com plem en ta tion in E. co li 1 1 2 1 PAN X ichun , CH EN M in , L IU Yan , and L IAO Zh ihua 1