HPLC法测定豆腐渣果中豆腐果苷的含量.pdf

中国医药生物技术 2010年 8月第5卷第4期 ChinMedBiotechnol，August2010，Vo1．5，No．4 DOI：10．3969／cmba．j．issn．1673—713X．2010．04．015 ·技 术 与 方 法 · HPLC法测定豆腐渣果中豆腐果苷的含量 杨胜，苏柘僮 ，杨明 豆腐渣果为山龙眼科山龙眼属 (Helici．a)植物深绿山龙 豆腐果苷样品溶液和标准品溶液 (浓度为 l8．8 g／rn1)进行 眼 (HelicianilagiricaBedd)的种子，其有效成分豆腐果苷 理论塔板数、分离度、拖尾因子实验，各平行实验 5次。 (Helicid，对苯 甲醛 O—D—D 阿洛吡喃糖苷)的化学结构类 1．2．3 方法学考察 似于天麻苷 (Gastrodin，对羟 甲基苯一O．D—D一吡哺葡萄糖 1．2．3．1 样品溶液制备 苷)1【_。药理研究表明，豆腐果苷对中枢神经系统的作用与 (1)提取方法与溶媒种类：参照文献 [4]以及预试结果， 天麻苷相似，但其镇静止痛作用较天麻苷强，对神经官能症 以水为溶媒，采用超声提取方法。 引起的头痛、头 昏、睡眠障碍的治疗作用显效快L2]。因此， (2)提取时间的考察：取豆腐渣果 100mg，加入 100ml 豆腐渣果在神经官能症治疗方面具有广阔的应用前景。目前 水，分别超声提取 30、45、60min制各样品溶液。 已有 以豆腐果苷为主要原料的市售品种豆腐果苷片，用于缓 以上述色谱条件分别对提取时间 30、45、60min三个 解神经官能症引起的头痛、头 昏及睡眠障碍，辅助治疗原发 水平进行考察，各平行实验 3次。 性头痛l3]。虽然 目前关于豆腐渣果化学成分、药理作用方面 (3)取样量的考察：分别取豆腐渣果 60、80、100mg， 的研究报道较多，但是关于豆腐渣果含量测定方法的研究 加入 100ml水，超声提取 30min制各样品溶液。 报道却较少。鉴于此，本文拟建立 HPLC 测定豆腐渣果中 以上述色谱条件分别对取样量 60、80、100mg三个水 豆腐果苷含量的方法，为豆腐渣果的进一步应用研究奠定 平进行考察，各平行实验 3次。 基础 。 1．2．3．2 专属性考察 分别配制空 白溶液、对照品溶液、 样品溶液，以上述色谱条件进行实验。 1 材料与方法 1．2．3．3 线性与范围考察 取浓度为 18．8I．tg／ml的标准 1．1 材料 品溶液，以上述色谱条件进样测定。以进样量 ( )为 x， 1．1．1 试剂 豆腐渣果购 自成都市荷花池药材市场；豆腐 峰面积 (mV．min)为 Y，做线性回归。 果苷标准品 (批号：100385．200401)购 自中国药品生物制 1．2．3．4 精密度考察 取同一豆腐渣果样品 6份，各约 品检定所；色谱纯乙腈购 自美国 Fisher公司；重蒸水为成 100mg，分别加入 100ml水，超声提取 30rnin制各样品 都中医药大学炮制与制剂教研室 自制；微孔滤头 (0．45rtm) 溶液。按照上述色谱条件，平行测定 6次。 购 自美国 Millipore公司，其他试剂均为国产分析纯。 1．2．3．5 稳定性考察 分别取样品溶液和标准品溶液 (浓 1．1．2 仪器 HPLC 仪 (LC一10ATvp输液泵、SPD一10Avp 度为 18．8Ixg／m1)，按照上述色谱条件，对稳定性进行考察。 紫外检测器、CT-10ASvp柱温箱)为日本岛津公司产品； 1．2．3．6 回收率考察 取豆腐果苷含量为 1．75％ 的同一 N2000HPLC 工作站为浙江大学智达信息工程有限公司产 样品 9份，各约 50mg，精密称定后分别置于 100ml的量 品；BP21ID 型电子分析天平为德国 S