【精选】基因工程乙肝新型疫苗_汉逊酵母表达系统_的开发.pdf

微生物学免疫学进展 200 1 年第 29 卷第 3 期 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 47 ( ) 基因工程乙肝新型疫苗 汉逊酵母表达系统 的开发 李河民 ,汪和睦 综述 ( 中国药品生物制品检定所 ,北京 　100050) ( ) 摘 　要 :HBsAg 不同成份在多条生物细胞系统中已表达成功 ,但至今仅哺乳动物细胞 CHO ,C127 等 和酿酒酵母 表达系统占领了大部分市场 。我们的临床观察也证明了酵母重组疫苗对 HBeA g 和 HBsAg 双阳性母亲所生的新生 儿免疫保护效果最好 。近年来又发展了汉逊酵母表达系统 。其特点为 30 个 adw2 HBsA g 基因拷贝整合于该酵母 染色体中;含有 MOX 、FMD 等高效启动子 ;能利用甘油 、甲醇为能量来源进行高密度发酵 ,每升发酵液的细胞干重 μ μ 达 100 g 以上 ;工程菌发酵生产稳定性好 ,HBsAg 颗粒表达量达 400 g/ ml ,最终纯化的 HBsAg 达 60 g/ ml ,其单位 产量比酿酒酵母表达系统高约 10 倍 ,小鼠实验证明该系统表达的 HBsA g 诱导体液和细胞免疫应答较好 ,值得开发 出产品 ,适合于我国广大农村使用 。在发展基因工程乙肝疫苗时也应考虑研究增强抗原细胞免疫工程菌的构建和 疫苗佐剂 。 关键词 : 乙肝 ;基因工程疫苗 ;汉逊酵母表达系统 + ( ) 中图分类号 :R3732 1 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 200 1 ( ) 　　全世界大约有 35 亿乙肝病毒 HBV 携带者 。 而环状正链则带有缺口。如图 1 所示 ,HBV 有 4 个 ( ) 其中我国超过 1 亿 ,现患 2000 万以上 ,南方流行重 功能性基因编码框架 ORF ,位于负链中 ,其编码 于北方 ,农村重于城市 。为了控制乙肝流行 ,降低病 HBc 、HBe 、Pol 、HB s 和 X 基因的 mRNA s ,要研究疫 毒携带率 ,我国于 1985 年研制成功血源乙肝疫苗 , 苗 ,首先必须找出有效的保护性抗原蛋白。197 1 年 〔1〕 90 年代研制了 CHO 基因工程疫苗和从美国 M SD S. Krugman 首次证明了乙肝病人血浆中的 22 nm ( ) ( ) 公司引进了酿酒酵母基因工程疫苗 YDV 生产技 病毒表面颗粒 HB sAg 加热后接种黑猩猩可产生保 术并已投入批量生产 。