糖尿病发病过程中大鼠主动脉平滑肌细胞Ca-%272%2b--ATPase活性以及血流动力学变化的的分析研究.pdfVIP

糖尿病发病过程中主动脉平滑肌细胞Cal+．ATPase活性以及血流动力学变化的研究 中文摘要 糖尿病发病过程中大鼠主动脉平滑肌细胞 Ca2+_ATPase活性以及血流动力学变化的研究 专 业：药理学(心血管方向) 硕士研究生：程晔 导 师：朱邦豪副教授 中文摘要 糖尿病是一种常见多发的慢性内分泌代谢紊乱综合征’由于体内胰岛素缺乏 或相对不足而引起的组织器官的代谢异常功能障碍，并最终可导致一系列合并症 出现，如糖尿病性心脑血管疾病、眼病、肾病及神经疾病等，并由此导致截肢、失 明甚至死亡等严重后果。糖尿病合并症可涉及体内多个器官和组织，大量研究表 明微血管及大血管功能损害是糖尿病合并症产生的重要原因。 近年来的研究提示糖尿病血管合并症与高血糖有着密切关系，慢性高血糖是 一个重要的启动因子，在糖尿病血管合并症的发生和发展过程中起着重要作用。 如果糖尿病患者血糖控制不好，高血糖本身即可以通过多种中间产物和下游底物 诱导细胞功能障碍，则可诱发改变血管的结构和功能的分子机制。高血糖致糖尿 病慢性合并症的分子机制是蛋白激酶c活性增强、晚期糖化终产物的产生、氧 化应激增强和多元醇通路增强。提示高血糖本身即可通过产生有毒的活性产物或 者改变细胞内的信号通路而导致血管内皮细胞或中膜平滑肌细胞的功能障碍。 研究发现，糖尿病或高血糖状态下多种细胞的钙泵活性发生变化，并且认为 其在糖尿病及其并发症的发生发展中起重要作用。 n 糖尿病发病过程中主动脉平滑肌细胞Ca2+．ATPase活性以及血流动力学变化的研究 中文摘要 血管平滑肌细胞胞浆Ca2十浓度升高是引起血管收缩的关键环节。在作为血管 membrane 舒缩活动中心环节的细胞内Ca2+的调节过程中，质膜钙泵(pl鹤ma reticulum Ca2+ATPase， Ca2+ATPase，PMCA)和肌浆网钙泵(sarco／endoplasmic exchange，NCX)将胞内游离钙泵出胞外或泵入肌浆网，以降低胞内游离钙离子 浓度。钙泵对维持细胞内钙平衡、保证细胞正常的结构和生理功能起了重要作用。 目前认为在主动脉平滑肌细胞上起对钙缓冲(calcium buffering)起主要作用的钙 占18％)，意义不大。 彩色多普勒超声(colorDopplerultrasound)对糖尿病发病时期主动脉血管的 观察分辨率、清晰度好，重复性强，并且可同时获得血管结构和血流动力学方面 的动态监测数据，对评价大血管弹性、顺应性有较高的价值，同时也可以明确大 动脉是否有狭窄，狭窄部位和狭窄程度。 目前对于糖尿病大血管病变机制的研究中，细胞内Ca2+调控紊乱占有多大角 色尚未明确：同时也未见有关糖尿病时期血管平滑肌细胞钙泵活性的变化以及糖 尿病发病过程中大鼠血流动力学变化的报道。本实验首次通过测定糖尿病大鼠发 病不同时期主动脉平滑肌细胞SERCA和PMCA活性以及利用彩色多普勒技术 测定主动脉血管结构及血流动力学的变化情况，初步探讨钙泵活性变化与血流动 力学变化之间的联系以及对糖尿病大血管病变产生和发展的影响。 第一部分糖尿病发病过程中大鼠主动脉平滑肌细胞钙泵活性的变化 新鲜分离4，8，12，16周糖尿病大鼠与同时期正常大鼠主动脉，用密度梯 度离心方法分离肌浆网蛋白、膜蛋白提取试剂盒提取细胞膜蛋白，Ca2+ATPase 试剂盒分别测定SERCA和PMCA活性，观察糖尿病发病的不同时期主动脉平滑 肌细胞钙泵活性的变化。结果显示： II! 耱尿病发病过程中主动脉平滑肌细胞c扩-ATPase活性以及血流动力学变化的研究 中文摘要 1．Wistar雄性大鼠，体重为2159_+15g(n=96)，随机分为正常对