波卓霉素生物合成基因簇的异源表达及产量提高.PDFVIP

第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报 34 1 Vol.34 No.1 年 月 , 2015 1 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Jan.201549~58 g g y 波卓霉素生物合成基因簇的异源表达及产量提高 , , 12 12 2 2 周 威 张学文 庄以彬 刘晓楠 2 1 2 殷 华 郁 彭 刘 涛 , ; , 1.天津科技大学生物工程学院 天津 300457 2.中国科学院天津工业生物技术研究所 天津 300308 ( ) , 摘要 波卓霉素是从波卓链霉菌 中分离得到的 具有抗革兰氏阳性菌及支原 Stretom cesbottroensis p y p , 。 体的生物活性 尤其重要的是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和抗万古霉素肠球菌有抑菌活性 试验通过构建基 , , 因组文库 PCR筛选获得包含完整波卓霉素合成基因簇的柯斯质粒 4E11通过接合转移的方法把 4E11转化至 , / , , 天蓝色链霉菌 M145中 对获得的异源表达株 M1454E11进行发酵 通过提取纯化和 HPLC-MS检测 表明 / ; / , ( ) M1454E11发酵液中产生了波卓霉素 试验并通过 RedET重组系统 以红霉素启动子 ermE*P1替换了波卓 , / 霉素生物合成簇抗性基因btmA和前提肽合成基因btmD的启动子 成功实现异源表达株 M1454E11波卓霉素 的产量提高。 ; ; ; ; 关键词 波卓链霉菌 波卓霉素 基因组文库 异源表达 启动子替换 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) Q785 A 1000-2421201501-0049-10 , 细菌耐药性的增强已成为世界性的难题 开发 种模式链霉菌变铅青链霉菌 TK24因对 甲基化