B细胞型非霍奇金淋巴瘤细胞株中CHFR基因表达及甲基化的研究Study on expression and methylation of CHFR gene in B cell type non Hodgkin lymphoma cell line.pdfVIP

B细胞型非霍奇金淋巴瘤细胞株中CHFR基因表达及甲基化的研究 摘要 目的检测B细胞型非霍奇金淋巴瘤Raji细胞中CHFR基因的表达和甲基 化状态，以及去甲基化试剂5．氮杂一2’一脱氧胞苷对淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影 响，为临床应用去甲基化药物靶向治疗非霍奇金淋巴瘤提供理论和实验依据。 t2mol／L，4 方法①体外培养非霍奇金淋巴瘤细胞株(Raji细胞)，分别以1 umol／L，7pmol／L，10u 处理Raji细胞；②采用RT-PCR方法检测反应性增生淋巴结组织及非霍奇金淋 12 12 u 1-1 mol／L，4mol／L，7mol／L，10 mol／L的5-Aza一2’一de处理后的Raji细胞中 经1012 12 12 u la 别经1 mol／L，4mol／L，7mol／L，10 mol／L去甲基化试剂处理后Raji细胞的 增殖抑制率；⑥流式细胞术检测分别经分别经1u 11 12 mol／L，4mol／L，7mol／L，10 1-1mol／L去甲基化试剂处理后的Raji细胞凋亡率。 结果①经RT-PCR检测发现反应性增生淋巴结组织中CHFR基因的相对 4-O．013，提示 表达量为0．898±0．07，Raji细胞中CHFR的相对表达量为O．121 可见甲基化与非甲基化条带共存的状态，即部分甲基化，经5-Aza一2’一dc处理后 12 u u 甲基化条带变暗，非甲基化条带亮度增加；④分别以1 mol／L，4mol／L，7 mol／L，1012 1|l p la 12mol／L mol／L，4mol／L，7mol／L，10 5-Aza．2’．de处理细胞后，细胞的凋亡 率增加，且在一定范围内凋亡率随5-Aza一2’一dc浓度的增高而增加，差异有统计 学意义(p0．05)。 结论OCHFR基因表达水平的降低在非霍奇金淋巴瘤的发生发展过程中 具有一定作用。②非霍奇金淋巴瘤细胞株Raji细胞中CHFR基因表达的降低与 其启动子的甲基化有关。③去甲基化试剂能恢复CHFR基因在淋巴瘤细胞中的 表达，并能抑制淋巴瘤细胞的增殖，促进淋巴瘤细胞的凋L，且具有一定的浓 度依赖性，为去甲基化药物应用于淋巴瘤的临床治戤邑供了定酴碍千甲羚仿握。 I掣型剃糊 硕士研究生：王红芳(儿科学) 指导老师： 宋爱琴 The and ofCHFRinB-cell ExpressionMehtyrlafion Non—Hodgkin’s Cells Lymphoma Abtract mRNA levelofCHFRin Objective：To B—cell investigateexpression gene