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- 2017-12-18 发布于天津
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磷脂脂肪酸phospholipidfattyacidPLFA甲基脂肪酸酯
第二章、微生物生态学研究的基本方法 一、微生物生态学研究的传统方法 直接测定(代表性) 培养方法(可培养问题0.01-1%) 代谢活力的测定(同位素标记、酶活力、ATP、叶绿素、呼吸作用和光合作用) 数学方法(人工模拟实验) 二、现代分子生物学方法 (分子标记,基于PCR技术DGGE /TGGE,RFLP/ARDRA,T-RFLPs,单链构象多态性SSCP,随机扩增多态性DNA( RAPD)分析,DNA测序(宏基因组测序), 培养技术) 微生物分子生态学的一些研究方法 3、生物标记物法(Biomakers ) 生物标记物通常是微生物细胞的生化组成成分,其总量通常与相应生物量呈正相关。 特定的标记物标志着特定的微生物,一些生物标记物的组成模式(种类、数量和相对比例)可作为指纹估价微生物群落结构。 首先使用一种合适的提取剂直接把生物标记物从环境中提取出来,然后对提取物进行纯化,后用合适的仪器加以定量测定。 磷脂是构成生物细胞膜的主要成分,约占细胞干重的5%。在细胞死亡时,细胞膜很快被降解,磷脂脂肪酸被迅速的代谢掉,因此它只在活细胞中存在,十分适合于微生物群落的动态监测。 环境16S rDNA文库的构建与组成分析技术 1990年,Giovannoni等首先用这一方法分析马尾藻海海面上浮游微生物的多样性。 16S rDNA文库中的蓝藻种类与培养出来的蓝藻很不一致; 发现了一个新的
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