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无锡金农大米蛋白粉中理化指标及微生物的测定
大米蛋白粉中理化指标及微生物的测定
无锡金农生物科技有限公司
“初辰”
大米蛋白
於慧利
主要内容
水分
灰分
脂肪
蛋白质
总糖(以蔗糖计)
总菌落数
大肠菌群
霉菌
致病菌(金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌)
无锡金农生物科技有限公司
水分
直接干燥法——适用于不含或含挥发性物质甚微的谷物及制品。
原理:利用食品中水分的物理性质,在101.3 kPa(一个大气压),温度101℃-105℃下,采用挥发方法,测定干燥前后样品中减失的重量,从而计算出水分的含量。
需要的设备:称量瓶(玻璃制或铝制);恒温干燥箱;干燥器(附干燥剂);天平;称量纸;玻璃棒;烧杯;药匙。
具体步骤:称量瓶于干燥箱中恒重1h,冷却→称取2g-10g(精确至0.0001g)于此称量瓶中→于101℃-105℃ 下干燥2-4h→盖好取出,于干燥器内冷却0.5h称重→再放入干燥箱内干燥1h左右,取出冷却称重,至前后两次质量差不超过2mg。
计算方法:见国标,注意有效数字的保留。
GB 5009.3-2010
无锡金农生物科技有限公司
水分的测定流程图
称量瓶恒重
称样品
干燥2-4h
恒重
结果计算
不恒重
干燥器内冷却0.5h
干燥1h
冷却0.5h
无锡金农生物科技有限公司
灰分
原理:食品经灼烧后所残留的无机物质称为灰分。
需要的设备及材料:马弗炉;坩埚(石英或瓷);乙酸镁溶液(80g/L);容量瓶;电炉;水浴锅。
注意事项:大米蛋白粉磷含量较高,需要添加助灰化剂乙酸镁。
具体步骤:
GB 5009.4-2010
坩埚的灼烧:取坩埚于马弗炉中550±25℃灼烧0.5h,冷却至200 ℃左右,取出,于干燥器中冷却0.5h。重复灼烧至两次差值低于0.5mg为恒重。
称样:称取3-10g(精确至0.0001g)。
测定:称取试样后,加入3.00mL乙酸镁溶液,使试样完全润湿,放置10min,于水浴上将水分蒸干;在电路上小火加热,使其充分炭化至无烟,再置于马弗炉中灼烧4h,冷却至200 ℃左右取出,干燥器中冷却0.5h。重复至恒重。
空白:吸取3份乙酸镁溶液,做3分试剂空白实验,当三次的标准偏差小于0.003g时,取其平均值。
总灰分的测定流程图
马弗炉的准备
坩埚的准备
称样品
炭化样品
灰化4h
取出
入干燥器冷却0.5h
恒重
结果计算
不恒重
乙酸镁溶液
无锡金农生物科技有限公司
其他理化指标
脂肪含量
蛋白质含量
总糖含量
索氏抽提法
原理:样品经石油醚、乙醚等溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质,即为粗脂肪。
GB5009.6-2003.
凯氏定氮法
原理:蛋白质经催化加热,被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵;碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后以盐酸标准溶液滴定;根据换算系数,得到蛋白质含量。
GB5009.5-2010
直接滴定法
原理:样品经处理去除蛋白质等杂质后,加入盐酸,在加热条件下使蔗糖等水解为还原性单糖,以直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。
方法:江西金农。
无锡金农生物科技有限公司
微生物指标
无锡金农生物科技有限公司
总菌落数—平板计数法
GB 4789.2-2010
定义:样品经处理后,在一定条件下(培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g/mL样品中形成的微生物菌落总数。
所需材料:恒温培养箱(36℃等);灭菌锅;移液管及吸耳球;锥形瓶;培养皿;pH试纸;平板计数琼脂培养基;磷酸盐缓冲液;生理盐水;玻璃棒;牛皮纸等。
检样,制备10-1稀释液(取25g样品加入225mL稀释液)
10倍系列稀释
选择2-3个适宜稀释度的样品,各取1mL加入培养皿内
每皿中加入15-20mL培养基,混匀
培养
计各平板菌落数
菌落总数(cfu/g)
每个样品:空白;平行
操作流程:
无锡金农生物科技有限公司
大肠菌群—MPN计数法
GB 4789.3-2010
定义:大肠菌群:一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
所需材料:培养皿:月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST),乳糖胆盐肉汤(BGLB),试管;小导管。
样品处理
初发酵
复发酵
计数
样品稀释,多个梯度。
三个连续梯度,接种于LST肉汤,培养,观察有气泡产生否。
产生气泡的,接种于BGLB,培养,观察产气情况,产气者为阳性。
根据阳性个数,查MPN表。
无锡金农生物科技有限公司
操作流程:
无锡金农生物科技有限公司
霉菌—平板计数法
GB 4789.15-2010
所需材料:振荡器;马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基或孟加拉红培养基。
样品处理
初发酵
计数
样品稀释,多个梯度。
三个连续梯度,
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