实验三+粪便标本分离1+细菌感染的的实验室诊断2014.pdfVIP

实验三 细菌感染的实验室诊断 实验内容 1. 录像：细菌的检查方法 2. 小讲课： 细菌分离鉴定的程序，实验设计 3. 学生操作： （1）粪便标本细菌分离（一） 接种麦糠凯平板 （2）抗酸染色 4. 病例讨论 5.示教： 结核分枝杆菌的菌落；抗酸染色形态，幽门螺杆菌 病原菌分离鉴定常规程序 标本采集与运送 接种适当培养基 本次实验 涂片、染色、形态观察 实验四 生化反应 血清学鉴定（毒力鉴定） 实验五 药敏试验 报告 标本的采集原则 1．严格执行无菌操作 尽量避免患者正常菌群或外界环境中杂菌污染标本。 2. 根据致病菌在患者不同病期的体内分布和排出部位，采 集不同的标本 （通常为病人或可疑者的血、尿、粪、痰、 脑脊液、脓汁等） 例如流行性脑膜炎患者取脑脊液、血液或出血瘀斑； 伤寒患者在病程第1周内取血液，第2～3周时可取粪便。 尽可能采集病变明显部位的材料。 3．应在疾病早期和使用抗菌药物之前采集标本 4．标本必须新鲜 采集后尽快送检，正确保存运输，尤其是抵抗力弱的细 菌。 临床标本中常见病原菌 临床标本 常见病原菌 金黄色葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、甲型链球菌、脑 血液 膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌、肺炎克氏菌、铜绿假单胞菌、 伤寒沙门菌、流感嗜血杆菌 咽拭子 A群溶血性链球菌、白喉棒状杆菌、百日咳鲍特菌 结核分枝杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克氏 痰 菌、铜绿假单胞菌、百日咳鲍特菌、嗜肺军团菌、流感嗜 血杆菌、肺炎支原体 脑脊液 脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希菌 粪便 志贺菌、沙门菌、空肠弯曲菌、大肠埃希菌、霍乱弧菌、 副溶血弧菌、艰难梭菌、脆弱类杆菌 大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、变形杆菌、肠杆菌、 尿 铜绿假单胞菌、肠球菌 生殖道分泌物 淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、梅毒螺旋体、阴道加德纳菌、 白假丝酵母菌 金黄色葡萄球菌、A群溶血性链球菌、铜绿假单胞菌、大肠 伤口及脓肿 埃希菌、产气荚膜梭菌、脆弱类杆菌 胃窦和胃体粘膜 幽门螺杆菌 病原菌的检验程序 •传统方法 主要有直接涂片染色镜检、分离培养、生化试验、血清 学试验、药物敏感试验等，有的尚需作动物试验等。 •细菌学快速诊断新技术 主要有聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR ） 脉冲场凝胶电泳（PFGE ） 基因芯片（gene chip，Microarray ） 核酸杂交（nucleic acid hybridization ）技术等