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急性脊髓挫伤后内皮素-1mRNA表达变化-中国病理生理杂志
( )
中国病理生理杂志 Chinese Journal of Pathophysiology 2002 ,18 2 : 189 - 191 ·189 ·
( )
[文章编号] 1000 - 4718 2002 02 - 0189 - 03
急性脊髓挫伤后内皮素 - 1 mRNA 表达变化
彭新生 , 李佛保 , 潘 滔 , 万 勇 , 陈立言
( 中山医科大学附属第一医院骨科 , 广东 广州 510080)
( ) ( )
[摘 要] 目的:观察脊髓损伤 SCI 后内皮素 - 1 ET - 1 mRNA 表达的解剖和空间以及含量变化规律 。方
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法 :改良Allen ’s 法 50 g - cm 制备急性大鼠脊髓挫伤模型 。原位杂交检测 SCI 前后脊髓组织中 ET - 1 mRNA 。图像
分析半定量测定伤区邻近段 ET - 1 mRNA 含量 。结果 : SCI 后损伤邻近段脊髓组织中 ET - 1 mRNA 阳性表达的神经
元 、胶质细胞与血管内皮细胞数量多于及信号强于对照组 , 以神经元表达改变为主 。除 48 h 组 ,伤后各时点脊髓灰
( )
质 ET - 1 mRNA 阳性染色的阳性单位与对照组比较差异显著 P 0 . 05 。伤区脊髓中 ET - 1 mRNA 阳性染色神经元
随时间逐渐减少 ,而胶质细胞阳性表达增加 。结论 : SCI 后脊髓组织中 ET - 1 mRNA 表达上调 ,提示 ET - 1 参与 SCI
后病理生理改变 。神经元是 SCI 后脊髓组织中 ET - 1 升高的主要来源 。
[ 关键词] 脊髓损伤 ; 内皮缩血管肽类 ; 杂交
[ 中图分类号] R651. 2 [文献标识码] A
( ) (
内皮素 endothelin , ET 参与了脊髓损伤 spinal 3 原位杂交
) [ 1 - 3 ] ET - 1 原位杂交检测试剂盒购于武汉博士德公
cord inj ury , SCI 后的继发损伤 。SCI 后 ET - 1 升
高的主要来源还不十分清楚 。尽管免疫组化结果表 司 。所用探针为地高辛标记的寡核苷酸探针 。原位
明 ,神经元是主要来源[4 ] ,但只有明确 ET - 1 基因的 杂交主要步骤 : ①玻片前处理 ; ②胃蛋白酶化 2 min ;
μ
mRNA 表达分布及变化才能确定其真正来源 。关于 ③地高辛标记的探针杂交液 20 L ,杂交 16 h ; ④杂
这方面的研究很少[5 ] 。本研究的 目的是观察大 鼠 交后洗涤 ; ⑤封闭液封闭; ⑥兔抗地高辛抗体孵育 60
SCI 后 ET - 1mRNA 表达的解剖和空间以及含量的变 min ; ⑦生物素化羊抗兔 IgG 孵育 30 min ; ⑧SABC 孵
化规律 ; 明确 SCI 后
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