卵白蛋白抗氧化肽分离与纯化 Isolation and Purification of Antioxidant Peptide from Ovalbumin.pdfVIP

第11卷第8期 中国食品学报 V01．1lNo．8 201 ofChineseInstituteofFoodScienceand NOV．20 1 l 1年11月 Journal Technology 卵白蛋白抗氧化肽分离与纯化 沈勇根 徐明生‘尹忠平 吴少福 (江西农业大学食品科学与工程学院 江西省教育厅天然产物研究与开发重点实验室 南昌330045) 摘要 目的：从卵白蛋白酶解液中分离抗氧化肽。方法：通过超滤、离子色谱和反相高效液相色谱法从卵白蛋白 酶解液中分离制备抗氧化肤，用电喷雾质谱肽的结构进行表征。结果：分离纯化获得抗氧化能力较强的3个 Glu)，分子质量433．18Da。结论：卵白蛋白经胃蛋白酶水解获得抗氧化多肤。 关键词 卵白蛋白；酶解；抗氧化肽；分离 文章编号 1009—7848(2011)08—0016—07 抗氧化肽属生物活性肽的一种。不仅具有多 现卵白蛋白酶解物具有强抗氧化活性。本文研究 肽产品的营养作用．而且具有抗氧化和清除自由 鸡蛋卵白蛋白酶解物抗氧化肽的分离纯化和结构 基的功能，可帮助机体消除多余的自由基，增强人 表征，为开发鸡蛋抗氧化肽产品提供理论基础。 体抗衰老、抗疾病能力。研究发现肌肽、谷胱甘肽 以及多种蛋白质源活性肽具有抗氧化作用．并逐 1材料与方法 渐显示出它们在医药、食品、饲料等领域应用的优 1．1 试验材料 势I--31。抗氧化肽按其来源可分为天然抗氧化肽、人 卵白蛋白(A5503、纯度98％)，Sigma公司； 工合成抗氧化肽和蛋白水解产生抗氧化肽3类。 080 胃蛋白P7000(实测酶活力517 U／g)，Sigma 酶法水解蛋白质是生产制备抗氧化肽的主要途 Fast 公司；or一脱氧核糖，Sigma公司；QSepharose 径M。 Flow．Pharmaeia公司：乙醇胺、硫代巴比妥酸 鸡蛋来源丰富，易被人体消化吸收，是人们主 (TBA)、三氯乙酸(TCA)、磷酸氢二钠、磷酸二氢 要的食物营养蛋白。鸡蛋中的卵白蛋白是蛋清的 钠、双氧水、乙二胺四乙酸(EDTA)，均为A．R级， 主要蛋白．占54％．由385个氨基酸组成单一肽 上海化学试剂公司产品。 链，为一种优质蛋白。它含有8种人体必需氨基 1．2主要仪器 酸，是获得生物活性肽的很好资源。Fujita等[81将卵UV一754紫外分光光度计。上海精密科学仪器 白蛋白用胃蛋白酶水解3h，再用RP—HPLC分离 出具有血管舒张活性的物质OA358—365。在胰凝 效液相色谱仪Waters1525，美国Waters公司；正 乳蛋白酶酶解物中也分离出Ovokinin(2～7)和 交加速电喷雾串联质谱Q—TOF2。英国Micromass OA359～364，这二种肽对自发性高血压大鼠有降 公司。 压作用[91。Fujita等还分离得到两种ACE(血管紧1．3试验方法 张素转化酶)抑制肽OAl