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绿咖啡豆提取物标准
绿咖啡豆提取物Green Coffee Bean Extract
本品为咖啡树Coffea rabica L.或罗布斯塔Coffee obusta L.成熟的种子去壳后经水或一定比例的乙醇水溶液提取和纯化而制成的提取物。
【性状】本品为浅黄棕色至黄棕色的粉末;气特异,味苦涩。
【鉴别】HPLC特征图谱 照高效液相色谱法(通则Y04)测定溶液 精密称取绿原酸对照品mg于0mL量瓶中,加60%甲醇溶液ml,超声溶解,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀精密量取5m至50m量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。
供试品溶液 精密称取品约25mg置50m量瓶中,加60%甲醇溶液超声溶解,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀
色谱条件 十八烷基键合硅胶填充柱(4.6(250mm,5μm)或同类型柱以乙腈水甲酸(250:750:1v/v/v)为流动相A,以乙腈水甲酸(100:900:1v/v/v)为流动相B按下表中的规定进行梯度洗脱;柱温25检测波长为330nm;流速为1.5m。理论板数按绿原酸峰计算应不低于10000。
时间(min) 流动相A(%, v/v) B(%v/v) 0 – 20 0→100 100→0 20 – 30 100 0 30 – 32 100→0 0→100 32 – 40 0 100 分别精密量取μL,注入液相色谱仪,测定,。
供试品图谱中应绿原酸计算各特征峰的相对保留时间,规定值为:0.66(-咖啡酰奎尼酸/-CQA),1.00(),1.06(-咖啡酰奎尼酸/4-CQA),1.53(5-阿魏酰奎尼酸/5-FQA),2.27(3,4-二咖啡酰奎尼酸/3,4-diCQA),2.39(3,5-二咖啡酰奎尼酸/3,5-diCQA),2.55(4,5-二咖啡酰奎尼酸/4,5-diCQA)。
对照图谱照高效液相色谱法(通则Y04)测定溶液 同【鉴别】项下。
供试品溶液 同【鉴别】项下。
色谱条件与系统适用性试验 同【鉴别】项下。
测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定,记录色谱图。以7个特征峰峰面积之和作为供试品中总绿原酸峰面积。
绿原酸含量按公式(E.1)计算。
……………………………E.1)
式中:X——供试品中绿原酸组分的质量分数(%);
Ax——绿原酸对照品的峰面积;
Cx——供试品溶液浓度(mg/mL);
As——供试品中绿原酸的峰面积;
Cs——绿原酸对照品浓度(mg/mL)。
总绿原酸含量按公式(E.)计算。
……………………………(E.2)
式中:X——供试品中总绿原酸组分的质量分数(%);
∑Ax——330nm波长下色谱图中绿原酸成分峰面积之和;
Cx——供试品溶液浓度(mg/mL);
As——供试品中绿原酸的峰面积;
Cs——绿原酸(-CQA)对照品浓度(mg/mL);
本品按干燥品计算,含绿原酸不得少于20%,总绿原酸不得少于40%。【检查】
照高效液相色谱法(通则Y04)测定
溶液 精密称取咖啡因对照品mg,置50ml量瓶中,加60%甲醇溶液ml,超声溶解,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀精密量取5m至ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。
供试品溶液 精密称取本品约25mg置0ml量瓶中,加溶解40℃以下,用稀释至刻度,摇匀十八烷基键合硅胶填充(4.6(250mm,5μm)以乙腈水(100:900v/v)为流动相;柱温25℃检测波长为nm。理论板数按峰计算应不低于000。 分别精密量取μl,注入液相色谱仪,测定,咖啡因含量按公式(E.)计算。
…………………………(E.3)
式中:X——供试品中咖啡因组分的质量分数(%);
Ax——供试品中咖啡因的峰面积;
Cx——供试品溶液浓度(mg/mL);
As——咖啡因对照品的峰面积;
Cs——咖啡因对照品浓度(mg/mL)。
本品C8H10N4O2)不得%。
粒度 按照粒度测定法(通则Y07)测定,80目筛通过率不得少于99%。
水分 按照水分测定法(通则Y08)测定,不得过5.0%。
灰分 按照灰分测定法(通则Y09)测定,不得过3.0%。
溶剂残留 按照溶剂残留测定法(通则Y10)测定,乙醇残留不得过000mg/kg。
重金属及有害元素 按照重金属测定法(通则Y11)测定,重金属含量不得过10mg/kg。按照铅、镉、砷、汞测定法(通则Y12)测定,铅不得过3mg/kg;镉不得过0.5mg/kg;砷不得过1.0mg/kg;汞不得过0.1mg/kg。
菌落总数 按照菌落总数测定法(通则G09)测定,细菌总数不得过1000cfu/g。
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