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微生物的群体生长与环境条件 （2） 主要内容 微生物群体生长周期； 微生物群体生长的连续培养方法； 环境条件对微生物生长的影响。 分批培养中细菌群体的生长 细菌群体的生长曲线 细菌群体的生长周期 根据微生物的生长速率（growth rate constant），即每小时的分裂代数不同，一般可以将典型生长曲线分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。 A 延滞期(lag phase) 特点：生长速率常数等于零；细胞形态变大或增长；核酸含量提高；合成代谢活跃，易产生诱导酶；对外界不良条件反应敏感。 影响因素：接种龄；接种量；培养基成分 B 指数期(exponential phase) 特点：生长速率常数最大；细胞进行平衡生长，菌体内各成分最均匀；酶系活跃，代谢旺盛 在指数 期三个最重要的参数是繁殖代数；生长速率常数；代时。 影响因素：菌种；营养成分；营养物浓度；培养温度 C 稳定期(stationary phase) 特点：生长速率常数等于0。 稳定期到来的原因：①营养物尤其是生长限制因子的耗尽；②营养物的比例失调，如C/N不合适；③酸、醇、毒素等有害代谢产物的积累；④pH、氧化还原电势等物化条件越来越不适宜。 D 衰亡期（decline phase） 特点：整个群体出现负增长（R为负值）。 原因：主要是外界的环境对继续生长越来越不利，从而引起细胞内的分解代谢大大超过合成代谢，继而导致菌体死亡。 细菌群体生长的连续培养 当微生物以单批培养的方式培养到指数期后期时，一方面以一定的速度连续流进新鲜的培养基，并立即搅拌均匀；另一方面以同样的流速不断流出培养物。这样，培养物就达到了动态平衡，微生物可以长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上，这种培养方法就叫连续培养（continuous culture）。 连续培养两种方式 恒化培养：通过控制培养液的添补速度来保持培养菌体的恒定的生长速度。采用的培养液是一种低浓度的限制性养料。 恒浊培养：根据细菌生长导致培养液中浊度变化来调节添补新鲜培养液的流速，从而保持培养基恒定的浑浊度，以控制菌数的恒定。 四个主要的环境因子 温度 酸碱度 水可给性 氧气 水可给性（water availability) 水活度：表示环境中水对微生物生长可给性高低的指标，用aw表示。aw值实质上是以小数来表示与溶液或含水物质平衡时的空气的相对湿度，即在相同温度和压力条件下，密闭容器中该溶液的水饱和蒸汽压与纯水饱和蒸汽压的比值。 aw＝Ｐ/Ｐ0＝RH×100----式中：P为溶液或含水物质的蒸汽压----------P0为纯水的蒸汽压----------RH为空气的相对湿度 氧气对微生物生长的影响 按照微生物与氧气的关系，把它们分成好氧菌（aerobe）和厌氧菌（anaerobe）两大类，并可继续分为五类： 专性好氧菌（strict aerobe）：必须在有分子氧的条件下才能生长，有完整的呼吸链，以分子氧作为最终的氢受体，细胞含超氧化物歧化酶和过氧化氢酶。如绿浓杆菌、白喉杆菌等。 兼性厌氧菌（facultative aerobe）：在有氧或无氧条件下均能生长，但有氧条件下生长得更好。如酿酒酵母、普通变性杆菌。 氧气对微生物生长的影响 微好氧菌（mircoaerophilic bacteria）：只能在较低氧分压下（0.01～0.03巴）才能正常生长的微生物。如霍乱弧菌。 耐氧菌（aerotolerant anaerobe）：可在有氧条件下进行厌氧生活的厌氧菌，即它们的生长不需要氧气，但氧气对它们也无害。如乳链球菌、乳酸杆菌等。 厌氧菌（anaerobe）：在有氧条件下不能生长，生命活动所需要能量是通过发酵、无氧呼吸、光合磷酸化或甲烷发酵等提供。 作 业 谈谈生长和繁殖的区别。 细菌生长曲线可以分为几个时期？各期有何特征？ 什么是微生物生长温度三基点？谈谈温度对微生物的影响。 * * 以二分裂的细菌为代表，假设细菌培养体在对数期to时的总菌数为No，那么到ｔ时的菌数Nt＝No×2n；式中ｎ为to到ｔ这段时间内细菌的繁殖代数。如果用G来表示世代时间(或倍增时间):即群体细胞数量增加一倍需要的时间，则：------------------G＝(t-to)/n (1)----∵------------Nt＝No×2n----∴------------logNt＝ｎlog2＋logNo ------------------ｎ＝〔logNt－logNo〕/ log2 = logNt/ N0/0.301 (2) 将(2)代入(1)式得：-