前列腺癌细胞系中干祖细胞的分选和鉴定-中华细胞与干细胞杂志.pdfVIP

( ) 2012 11 2 4 Chin J Cell Stem Cell (Electronic Edition), Nov 2012,Vol.2, No.4 254 中华细胞与干细胞杂志电子版 年 月第 卷第 期 •实验研究• 前列腺癌细胞系中干祖细胞的分选和鉴定 马志方 许召良 岳亮 郝振文 王东文 【摘要】 目的 LNCaP S/P 探讨在前列腺癌细胞系 中分选和鉴定干祖（ ）细胞的方法。  方法 常规培养前列腺癌细胞系LNCaP ，用CD133 和CD44 抗体标记细胞，流式细胞术分 S/P RT-PCR Western blot 选，条件培养液培养分选出的 细胞，用定量 、 和免疫荧光染色方法 S/P CD133 α2β1 AR CK5 CK8 PSA 检测 细胞 、 整合素、雄激素受体（ ）、 、 和 的表达，前列腺 S/P S/P 细胞球体形成实验检测 细胞自我更新能力，琼脂糖凝胶克隆形成实验检测 细胞成 t 结果 1 瘤能力。各指标两组间差异比较采用独立 检验。 采用流式细胞术可以分选出约占 ﹪ S/P S/P S/P CK5 CD133 α2β1 mRNA 的 细胞，与非 细胞相比， 细胞 、 、 整合素表达增高（ 表达 t = 17.376 3.859 8.611 P 0.000 0.021 0.001 CK8 AR PSA 比较， , ， ； ， ， ）， 、 和 的表达明显下降 mRNA t = 3.518 11.372 3.845 P  0.029 0.000 0.018 14 d S/P （ 表达比较， , ， ； ， ， ）。细胞培养 后，非 S/P 4.35 ± 0.87 35.12 ± 4.56 细胞和 细胞形成前列腺球的数量分别为（ ）个和（ ）个,两者比 t = 13.013 P 0.000 14 d S/P S/P 较差异具有统计学意义（ , ）。细胞培养 后，非 细胞和 细胞可 18.34 ± 1.21 82.27 ± 7.54 以在软琼脂凝胶中克隆性生长，阳性克隆数分别为( )个克隆和 ( )