高三生物复习精品选修专题_生物技术实践知识汇总.pptVIP

三、微生物的分离与计数 1．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 Ⅰ.分离分解尿素的细菌所使用的特定培养基 分离分解尿素的细菌的培养基应为选择培养基，培养基中的氮源只有尿素，理论上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生长。其配方如下： KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素(唯一氮源) 1.0g 琼脂 15.0g 将上述物质溶解后，用自来水定溶到1 000mL。 Ⅱ.统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作： a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝ ×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 2．分解纤维素的微生物的分离 (1)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌