糖原PAS染色试剂盒使用方法及注意事项.pdfVIP

糖原PAS染色试剂盒使用方法及注意事项 货号: G1281 规格: 4×50ml/4×100ml 有效期：6个月有效。 产品内容： 编号 4×50ml 4×100ml Storage 名称 试剂 （A）过碘酸溶液 50ml 100ml 4℃ 避光 试剂 （B）Schiff Reagent 50ml 100ml 4℃ 避光 试剂 （C）苏木素染色液 50ml 100ml RT 避光 试剂 （D）酸性乙醇分化液 50ml 100ml RT 产品说明： 糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显 示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色液不仅能够显示糖原，还能显示中性黏 液性物质和某些酸性物质，以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。 过碘酸 （又称高碘酸）是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使 之变为二醛，醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧 化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在即能把乙二 醇基氧化成醛基，又不至于过氧化，这是很关键的步骤。 本糖原PAS染色液的特点: 采用Solarbio特有配方技术，大大增强了染色效果；性能稳定， 特异性强；操作简捷，仅需1h左右。 自备材料： 1、 10%福尔马林固定液 2、蒸馏水 3、乙醇 操作步骤 （仅供参考）： 1、 常规固定，常采用10%的福尔马林，常规脱水包埋。 2、 石蜡切片脱蜡入蒸馏水；冰冻切片直接入蒸馏水。 3、 自来水冲洗2～3min，再用蒸馏水浸洗2次。 4、 置于过碘酸溶液中，室温放置5～8min，一般不宜超过 10min。 5、 自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。 6、 样本放入 Schiff Reagent，置于室温阴暗处，浸染10～20min。 7、 自来水冲洗10min。 8、 样本置于苏木素染色液中，染细胞核1～2min。 9、 酸性乙醇分化液分化2～5s。 10、 自来水冲洗10～15min后，更换双蒸水清洗，使其返蓝。 11、逐级常规乙醇脱水。 二甲苯透明，中性树胶封固。 染色结果： PAS 反应阳性物质 红色或紫红色 细胞核 蓝色 细胞质 深浅不一的红色 备注：颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和 Schiff Reagent中作用时间的长 短。 阴性对照(可选)： 1、 取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3) 100ml，处理30～60min，与其他切片共同入过碘 酸溶液。结果应为阴性。 2、 (备选方案)取唾液片 （过滤后用）处理30～60min，与其他切片共同入过碘酸溶 液。 结果应为阴性。 3、 (备选方案)如果对照片采用其自身样本，对照片不经过碘酸溶液这一步，直接入 Schiff Reagent。 结果应为阴性。 注意事项： 1、 切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。 2、 过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃最佳。 3、 过碘酸溶液和Schiff Reagent应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳 光和空气。使用前，最好提前30m