2016新课标三维人教生物选修3 专题1 1.1 DNA重组技术的基本工具.doc

1．1DNA重组技术的基本工具 一、基因工程的概念及其诞生与发展 1．基因工程的概念[填表] 别名 DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 结果 创造出人类需要的新的生物类型和生物产品 2．基因工程的诞生和发展 (1)基础理论的突破：DNA是遗传物质的证明；DNA双螺旋结构和中心法则的确立；遗传密码的破译。 (2)技术的发明：基因转移载体和工具酶的相继发现；DNA合成和测序技术的发明；DNA体外重组的实现及重组DNA表达实验的成功；第一例转基因动物的问世及PCR技术的发明。 二、DNA重组技术的基本工具 1．限制性核酸内切酶(又称限制酶) (1)来源：主要来自原核生物。 (2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)结果：产生黏性末端或平末端。 2．DNA连接酶 (1)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 (2)种类：[填表] 　　种类 比较　　 E·coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 大肠杆菌 T4噬菌体 特点 只能连接黏性末端 既可以连接黏性末端，又可以连接平末端 3．基因进入受体细胞的载体 (1)作用：将外源基因送入受体细胞中。 (2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等。 (3)条件： ①能在宿主细胞内稳定保存并自我复制。 ②具有一个或多个限制酶切割位点，供外源DNA插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 三、重组DNA分子的模拟操作 1．所用材料用具中，剪刀代表EcoR，透明胶条代表DNA连接酶。 2．用剪刀进行DNA“切割”时，应找出G—A—A—T—T—C序列并在G—A之间作切口进行“切割”。 3．若操作正确，不同颜色的黏性末端能互补配对。 1．基因工程是一种新兴的生物技术，实施该工程的最终目的是(　　) A．定向提取生物体的DNA分子 B．定向对DNA分子进行人工“剪切” C．在生物体外对DNA分子进行改造 D．定向改造生物的遗传性状 解析：选D　基因工程也称DNA重组技术，它是按照人类的意愿，将某种基因有计划地转移到另一种生物中去的新技术，故实施基因工程的最终目的是定向改造生物的遗传性状。 2．在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是(　　) A．将目的基因从染色体上切割出来 B．识别并切割双链DNA的特定核苷酸序列 C．将目的基因与载体结合 D．将目的基因导入受体细胞 解析：选B　限制酶在基因工程中的作用是识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并在特定位点切割磷酸二酯键，产生末端。它没有拼接和导入功能。 3．“分子缝合针”——DNA连接酶“缝合”的部位是(　　) A．碱基对之间的氢键 B．碱基与脱氧核糖 C．双链DNA片段间的磷酸二酯键 D．脱氧核糖与脱氧核糖 解析：选C　相邻的两个脱氧核苷酸之间由磷酸和脱氧核糖形成的磷酸二酯键连接，DNA连接酶连接的是此化学键。 4．下列通常不被用作基因工程载体的是(　　) A．细菌质粒　　　　　 B．λ噬菌体的衍生物 C．动植物病毒 D．细菌核区的DNA 解析：选D　常用的载体有：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。细菌的核区由一个大型的环状DNA分子经反复折叠缠绕而成，它控制着细菌的主要性状，一般不能用作基因工程的载体。 5．下列不属于质粒可作为基因载体理由的是(　　) A．能复制 B．有多个限制酶切点 C．具有标记基因 D．它是环状DNA 解析：选D　作为载体必须具备的条件：能在宿主细胞中稳定保存并大量复制；有一个或多个限制酶切点；有标记基因，便于筛选。 1．限制性核酸内切酶 (1)作用特点：具有专一性，表现在以下两个方面。 能够识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列。 能够切割特定序列中的特定位点。 (2)识别序列的特点：遵循碱基互补配对原则，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如以为轴，两侧碱基互补对称。 (3)作用产物：黏性末端和平末端。 黏性末端：是限制性核酸内切酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的，如图所示： 平末端：是限制性核酸内切酶在它识别序列的中心轴线处切开时形成的，如图所示： 2．DNA连接酶与限制性核酸内切酶的关系 (1)区别： 作用 应用 限制性核酸内切酶 使特定部位的磷酸二酯键断裂 用于提取目的基因和切割载体 DNA连接酶 在DNA片段之间重新形成磷酸二酯键 用于目的基因和载体的连接 (2)两者的关系可表示为： 3．DNA连接酶与DNA聚合酶的比较比较项目 DNA连接酶 DNA聚合酶 相同点 作用实质相同，都是催化磷酸二酯键