紫外线诱变选育高产柠檬酸菌株和发酵条件研究.pdfVIP

第43卷 第 9期 化 工 技 术 与 开 发 Vo1．43 No．9 2014年 9月 Technology DevelopmentofChemicalIndustry Sep．2014 紫外线诱变选育高产柠檬酸菌株及发酵条件研究 邓新云，罗跃中，颜 鑫，刘小忠 (湖南化工职业技术学院，湖南 株洲 412004) 摘 要：对1株初筛产柠檬酸黑曲霉进行紫外线诱变处理，并对选育的优势菌进行了发酵条件实验。研究结果 表明，选育出的(Aspergillusniger)UV一5是一株优 良高产菌株 该菌株的产酸率达到11．54％，比初始菌株(YZ一35) 产酸率提高了24．41％；以红薯为发酵原料，在初始糖浓度15％、温度为35℃、起始pH值为5．5，转速140r·min～、 发酵84h的优化条件下，摇瓶发酵平均产酸率可达到13．15％。 关键词：黑曲霉；紫外线诱变 ；柠檬酸；发酵条件 中图分类号：TQ921．1 文献标识码 ：A 文章编号：1671．9905(2014)09．0001．04 柠檬酸 (citricacid)，又名枸橼酸，是一种三元羧 1．2 主要仪器和设备 酸，其学名为 3．羟基 ．3一羧基戊二酸，在 自然界中分 UV一2550紫外分光光度计、电子天平 、电炉、 布广泛，主要存在于柠檬、柑橘、梅子等果实中。现 蒸汽灭菌锅、恒温水浴箱(LDZX一50FAS)、超净工 在柠檬酸被广泛应用于食品、饮料、医药、化工、冶金 作台、全温空气摇床(QYC一21)、生化培养箱(HPS一 等领域 [1-2]，全球的年产量超过 100万t，而且年需求 250)。 量仍在以3．5％～4％的速度增长 [3】。目前柠檬酸的 l_3 主要化学试剂 发酵菌株主要以黑曲霉为主，故而所用菌株的产酸 葡 萄糖 (CP)，NH4NO3(AR)，K2HPO (AR)， 能力是影响现代柠檬酸发酵生产关键因素。目前野 溴 甲酚绿(AR)，MgSO4·7H20(AR)，硫酸二乙酯 生型菌种的柠檬酸产量相对较低。如何利用各种诱 (AR)，醋酐(AR)，酒石酸钾钠(AR)等。 变手段选育高产脂肪酶生产菌一直是国内外研究 1．4 培养基 的重点。近年来，国内外有些对柠檬酸发酵菌种的 马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)斜面培养基：马铃薯 选育研究报道 4[-6]o本研究利用紫外线对初筛菌株 200g，葡萄糖 15g，琼脂20g，加水 1000mL，pH值 自 A(spergillusniger)YZ一35进行物理诱变来提高其产 然。 酸能力，以获得具有应用价值的工业生产菌株。 固体平板培养基：葡萄糖 5％、NHNO3g·L一、 本研究以初筛性价比较高的产柠檬酸菌株为出 K2HPO41．0g·L～、溴甲酚绿0．05％、琼脂 20g-L～。 发菌，经紫外线诱变处理，改进和提升其产酸率及耐 发酵培养基：甘薯f粉)5Og·L-1葡萄糖5Og·L-、 酸度。同时对改良后的优势菌的发酵条件进行单因 NI-I4C13．0g。L-、KH2PO41．Og。L-、M#O47H200．20gL‘-。 素初步研究，旨在进一步优化现代柠檬酸发酵工艺