九孔鲍鱼纤维素酶的分离纯化与性质分析 Isolation, Purification and Characterization Analysis of a Cellulase from Abalone(Haliotis Diversicolor).pdfVIP

第10卷第3期 中国食品学报 V01．10No．3 20l 0f 0年6月 InstituteFoodScienceand Jun．20l 0 Joumal“Chinese Technolog)r 九孔鲍鱼纤维素酶的分离纯化与性质分析 孙乐常 巫朝华 蔡秋风 张凌晶 苏文金 曹敏杰宰 (集美大学生物工程学院 福建厦门361021) 摘要采用SP—seph锄se阳离子葡聚糖凝胶交换柱层析、sephacryls一200丙烯葡聚糖凝胶柱层析和Hydrox- )rapatite羟基磷灰石柱层析，从九孔鲍鱼(删如硫锄e瑙记Dh)消化腺中分离纯化到一种纤维素酶。SDS—PAGE 结果显示，该酶的分子质量约为55 5．5。该酶在温度 kDa。该酶水解羧甲基纤维素钠的最适温度50℃，最适pH 5．0～7．0之间具有较好的稳定性。 40℃以下，pH 关键词 鲍鱼；纤维素酶；纯化；性质 文章编号1009—7848(2010)03—0076—07 每年地球上绿色植物的光合作用产生大于 题13】，限制了纤维素酶的发展。因此，如何获得一种 100亿t的植物材料，其中至少三分之一是纤维稳定性好．活力好的纤维素酶是当今该领域的关 素【ll。除少数软体动物、甲虫自身能产生纤维素酶． 键问题。 反刍动物通过瘤胃微生物发酵利用纤维素外．其 1963年。Marshall等人首次证明了蜗牛中动 它动物对纤维素利用率很低或因自身缺乏纤维素 物内源性酶的存在【21；1998年，Smant等用分子生 酶而不能利用纤维素。对人类而言，纤维素是自然 物学方法从植物寄生的线虫中得到内切B一1，4一 界中数量最大的可再生性物质。它的降解是自然 葡聚糖酶的cDNA[4】，进一步证明了动物体内存在 界碳素循环的中心环节。纤维素的利用与转化对 内源性纤维素酶。动物内源性纤维素酶因其特殊 于解决目前世界能源危机、粮食短缺、环境污染等 性质，故成为纤维素酶研究领域的热点。2000年． 问题具有十分重要的意义。对纤维素酶的研究已 Xu等在紫贻贝(撇if凇edu玩)中分离到一种耐 成为2l世纪各国饲料、营养等领域科研人员共同 热的低分子质量(约19．7kDa)的纤维素酶并确定 关注的课题。 其一级结构【5l：同年，Nakashima等人从一种低等白 纤维素酶(cellulase)是降解纤维素糖苷键生 蚁(cop￡讲e册船．加删帆獬)中分离到一分子质量 为48kDa的内切B—l，4一葡聚糖酶【q。2003年 成葡萄糖的一类多组分酶系。1924年Cleveland 在研究白蚁(m如M玩e，7艘s／z鲫咖es)的纤维素酶Wang等从软体动物福寿螺(A，印uZZ新oc瑚senn) 时发现其体内的纤维素酶是消化肠腺中的微生物 中分离到一个具有外切B一1，4一葡聚糖酶、内切 分泌产生的【2】。此后，人们对纤维素酶的研究主要 B一1，4一葡聚糖酶和内切B—l，4一木聚糖酶3种活 集中在微生物的身上。并长期致力于分离、鉴定能 性，分子质量为41．5kDa的多功能纤维素酶 降解纤维素和产生纤维素酶的各种微生物。迄今 为止。微生物纤维素酶的分离纯化方法已成熟，其 d括c潞^肌n反)中也分离到一种分子质量为66 作用机制及分子结构也已解明．然而现有纤维素 kDa的纤维素酶，并确定其一级结构【91。2004年 酶产生菌存在产酶能力低下且组分不平衡等问