钠钾-ATP酶的结构.pptVIP

Na+,K+-ATP酶的晶体结构 杜 文 义 ——川抗所 目录 Na+,K+-ATP酶的结构 Na+,K+-ATP酶的作用原理 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 Na+,K+-ATP酶的功能 Na+,K+-ATP酶的结构 Na+,K+-ATP酶是P型离子转运ATP酶中的最重要成员 Na+,K+-ATP酶的结构 Na+,K+-ATP酶的结构 α-亚基：主要由A、N、P 三个区域组成 Na+,K+-ATP酶的结构 α-亚基——A区域 又称为驱动器 Na+,K+-ATP酶的结构 α-亚基——N区域 是核苷酸的结合点 Na+,K+-ATP酶的结构 α-亚基——P区域 称为磷酸化作用点 Na+,K+-ATP酶的结构 β-亚基 Na+,K+-ATP酶的结构 辅助FXYD蛋白 Na+,K+-ATP酶的作用原理 每水解一个ATP分子，可以将3个Na+泵出细胞， 同时携带2个K+进入细胞 Na+,K+-ATP酶的作用原理 经过研究表明，Na+,K+-ATP酶的作用过程实际上是其两种构象（E1和E2）的相互转变 Na+,K+-ATP酶的作用原理 E1和E2构象的相互转变 1、由于ATP末端的磷酸基水解，使E1构象磷酸化，磷酸化的酶的能量较高，所以能够自动转变为低能量状态的E2构象，同时由亲Na+的转变为亲K+的构象，向细胞外释放3个Na+，结合2个K+。 2、磷酸化的酶在膜外的K+的作用下，可以去磷酸化，携带2个K+，由E2转变为E1构象，将K+释放到细胞内。 Na+,K+-ATP酶的作用原理 最近的研究表明： Na+，K+-ATP酶实质上是一个Na+泵，因为在缺少K+的情况下它照常工作。 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 Na+的三个结合位点并不是凭空猜想的，而是通过将一个水分子放入其中，计算其不同位置的部分价所得到的，这三个点对Na+具有较高的亲和力。 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 为什么是Na+亲和性的而不是K+亲和性的？ Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 位点Ⅰ和Ⅱ之间的距离是3.2-3.6?（1?=0.1nm），Na+离子半径=0.95? K+ 离子半径=1.33? 两个结合位点之间的距离能够容下2个Na+，但是对于2个K+来说就比较拥挤了。 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 结合的顺序：第一个Na+先与位点Ⅲ结合，第二个Na+与位点Ⅰ结合，第三个Na+最后与Ⅱ结合，这是由三个位点的空间结构所决定的 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 第一步：释放K+，使松散的M6部分能够自由的转动，并且使丝氨酸775改变其侧链的方向，同时使第一个Na+到达位点Ⅲ。 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 为了保证第一个Na+能够顺利到达位点Ⅲ，位点Ⅱ和Ⅰ的结构必须是未定型的 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 在E1构象时，Na+,K+-ATP酶会向细胞内释放其结合的2个K+，从而使M6能自由旋转； 丝氨酸775改变其侧链的方向； Na+结合到位点Ⅲ能够修复丝氨酸775的侧链和M6的松散部分，这样使天冬氨酸804和808的羧基能被位点Ⅰ的Na+所使用。 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 第二步：位点Ⅱ继续保持未定型状态，位点Ⅲ结合后天冬氨酸804和808的羧基能协助第2个Na+的结合 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 M6螺旋旋转后到达一个稳定的状态； 第二个Na+与M6侧链的天冬氨酸804和808的羧基结合； Na+结合到位点Ⅰ会将M4E末端细胞质上的丙氨酸323带到位点Ⅰ和Ⅱ的Na+协调的位置，有助于位点Ⅱ形成。 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 第三步：第3个Na+结合到位点Ⅱ Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 Na+,K+-ATP酶中的三个Na+结合位点 结合的特点：环环相扣 第一个Na+的结合M6螺旋的松散部分稳定，然后将羧基带到第二个结合点； 第二个Na+的结合使一个螺旋的末端复位，然后正确形成了第三个结合点； 第三个Na+的结合会改变M4C的路径，使α-亚基中的P区可以弯曲并且接受Mg2+和ATP水解后的磷酸盐； P区是磷酸化的作用点，磷酸化后，Na+,K+-ATP酶从E1构象转变成E2构象，完成各种生理功能。