HPLC法测定卵白蛋白脂质体中蛋白质含量.pdfVIP

·药品检验· HPLC 法测定卵白蛋白脂质体中蛋白质含量Δ ＊ # 陈 剑 ，黄 泓，徐宇虹（上海交通大学药学院，上海市 200240） 中图分类号 R977.6；R927.1 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）41-3889-03 摘 要 目的：建立测定卵白蛋白（OVA ）脂质体中OVA 含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX300SB-C ；8 流动相A 为0.01％三氟乙酸水溶液，流动相B 为0.01％三氟乙酸乙腈溶液，梯度洗脱，流速为0.8mL ·min－1；检测波长为220nm ；柱 温为40 ℃。结果：OVA 检测浓度线性范围为10～500µg ·mL－1（r ＝0.9995）；平均回收率为101.2％，RSD ＝0.74％（n ＝6）。结论： 建立的测定方法灵敏度高、专属性强、简便快捷，可用于OVA 脂质体中OVA 的包封率以及含量的测定。 关键词 脂质体；卵白蛋白；蛋白质；高效液相色谱法；含量 Content Determination of Protein in Ovalbumin Liposomes by HPLC CHEN Jian ，HUANG Hong ，XU Yu-hong （School of Pharmacy ，Shanghai Jiaotong University ，Shanghai 200420，China ） ABSTRACT OBJECTIVE ：To establish a method for the content determination of ovalbumin （OVA ）in OVA liposomes. METH- ODS ：HPLC method was adopted. The separation was carried out on ZORBAX300SB-C8 column with mobile phase A consisted of 0.01％ trifluoroacetic acid-water and mobile phase B consisted of 0.01％ trifluoroacetic acid-acetonitrile （gradient elution ）at the flow rate of 0.8 mL ·min －1. The detection wavelength was set at 220nm and column temperature was 40 ℃. RESULTS ：The linear range of OVA was 10to 500µg ·mL －1 （r ＝0.999 5）with an average recovery of 101.2％ （RSD ＝0.74％，n ＝6）. CONCLUSION ： The method is found to be sensitive ，specific and simple. It can be used for the content and encapsulation coefficency determination of OVA in OVA liposomes. KEY WORDS Liposomes ；Ovalbumin ；Protein ；HPLC ；Content OAG 的T、η及IR ，结果平均值分别为37.1 ℃、4 750mPa ·s、 参考文献 57.6％（n ＝3），且明显高于空白温敏凝胶组的IR （36.2％，P ＜ [ 1] 金璐燕，李 娟.泊洛沙姆407在制剂中的应用进展[J]. 0.01）。 药学与临床研究，2009，17（3）：231. 3 讨论 [ 2] 杜广增，赵浩如.Poloxamer407温敏性即型凝胶的制备和 本试验以T、η、IR 为评价指标，筛选不同基质和附加剂对 应用进展[J].药学进展，2008，32（4）：163. OA