牛凝乳酶基因的克隆与表达 Cloning and expression of the bovine chymosin gene.pdfVIP

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2017-12-17 发布于上海
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牛凝乳酶基因的克隆与表达 Cloning and expression of the bovine chymosin gene.pdf

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牛凝乳酶基因的克隆与表达 Cloning and expression of the bovine chymosin gene

Ⅵr、w．chinadairy．net 中国乳品工业 rvgy@chinajournal．net．cn dairy 牛凝乳酶基因的克隆与表达王景会，荽媛媛，李启云，张莉，徐波，李达，杨贞耐 (中国农业科技东北创新中心农产品加工研究中心，长春130124) 摘要：为了获得大量高纯度高活性的凝乳酶制荆。采用基因工程方法，从犊牛皱胃黏膜细胞中克隆得到凝乳酶基因，然后将此基因插 BL21(I)E3)中获得高效表达，在低温诱导时主要以可溶性蛋白的形式存在，并具有凝乳活性。关键词：牛凝乳酶：克隆；表达中图分类号：TS252．1 文献标识码：A 文章编号：1001-2230(2008)10-0008—05 and ofthebovine Cloningexpression chymosingene WANG Zhen—nai Li，XUBo，LIDa，YANG Yuan—yuan，LIQi—yun，ZHANG Jing—huiJIANG of 1 1 of ResearchCenter 30 (Center Technology，NortheastAgricultural China，Changchun24，China) Agro—Food of ofthis islimitedduetOde- cheeseismade theuseofbovine thesource mainlyby chymosin，but supply enzyme Abstract：Traditionally numberofcalves．InordertOobtain of andactive ofbovine wasclonedfromthe enzyme，the chymosin creasing largequantifiespure gene DNA wastheninsertedintothe vector inthe mucosalcellsoftheabomasumofcalf．The fragment prokaryoticexpressionpTWINl，resulting transformedinto ofthe was at E。coliBL21(DE3)．Expressionenzymeperformed expressionplasmidpTWINl／EchybF2．which哪further induction．SDS—PAGEand tests that Was insolubleformatalowtem— different withIPTG showed temperatures activity chymosinexpressed therecombinanthad activities． perature，and proteinmilk—clotting words：bovine Key ch