制药或GMP气相和液相色谱柱综合管理文件.doc

概述： 高效液相色谱柱 构造：色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。色谱柱是高效液相色谱的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透粉性，延长柱子的使用寿命非常重要。因此对高效液相色谱柱的维护是关键。 高效液相色谱柱的分类：液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。正相柱：多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。毛细管色谱柱由两部分组成管身和固定相2(4mm，长度为1(10m左右；后者内径在0.2(0.5mm，长度一般在25(100m。在满足分离度的情况下，为提高分离速度，现在也有人使用高柱效、薄液膜的10m短柱。根据固定液的化学性能，色谱柱可分为非极性、极性与手性色谱分离柱等。 色谱柱的选型与求购： 色谱柱选型 1.1高效液相色谱柱 如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。 非极性或极性较小的样品可用一般的C18柱 酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的C18柱，PH范围2-9（12） 糖类，氨基酸，有机酸，多环芳烃，GPC有专用柱 超快速柱子-填料粒度2μm 键合相色谱柱 优点∶ 固定相稳定，不易流失 应用广泛，可使用多种溶剂 消除硅羟基的不良影响 缺点∶ pH值不能小于2或大于8 同样填料，各种牌号色谱柱不尽相同 反相HPLC柱（C18）的性能 常规C18填料的稳定性 硅胶基质填料 pH范围：2-8 pH值大于7时键合相粉碎或溶解 pH值小于2时键合相的化学键断裂 经常用缓冲液 固定相降解 填料新的键合技术 - PH范围 2-12 - 稳定性好，使用寿命长 1.2气相色谱柱 柱长度选择 ：分辨率与柱长的平方根成正比。在其他条件不变的情况下,为取得加倍的分辨率需有4倍的柱长。较短的柱子适于较简单的样品,尤其是由那些在结构、极性和挥发性上相差较大的组分组成的样品。一般来说：15m的短柱用于快速分离较简单的样品，也适于扫描分析；30m的色谱柱是最常用的柱长，大多数分析在此长度的柱子上完成；50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。应该注意，柱长增加分析时间也增加。 柱内径的选择：柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。小口径柱比大口径柱有更高柱效，但柱容量更小。0.25mm：具有较高的柱效，柱容量较低。分离复杂样品较好。0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色谱柱，但柱容量约高60%。0.53mm：具有类似于填充柱的柱容量，可用于分流进样，也可用于不分流进样，当柱容量是主要考虑因素时(如痕量分析)，选择大口径毛细管柱较为合适。 液膜厚度的选择 液膜厚度影响柱子的保留特性和柱容量。厚度增加，保留也增加。0.1～0.2μm ：薄液膜厚度的毛细管柱比厚液膜的毛细管柱洗脱组分快，所需柱温度低，且高温下柱流失较小，适用高沸点的化合物的分析。0.25～0.5μm ：常用的液膜厚度。厚液膜：对分析低沸点的化合物较为有利。 固定相的选择不同的固定相对不同的分析物的影响不同，根据相似相溶原理，性质越相近，固定相对其的流动阻力越大，其保留时间越长．色谱柱就是通过这个原理将不同性质的混合物相互分开的．您现在就可以看到其实气相色谱柱的分离效果主要取决于其固定相，柱长度，柱内径，液膜厚度这几个因素，从原理上讲，这几个因素相同的柱子，其分离效果是完全一样的。考虑到这一点，现在您完全根据这个更加本质的依据来选择您的气相色谱柱，而不必一定去购买昂贵的标准指定气相色谱柱。 色谱柱的选型与求购 根据检验方法或者药典标准中的需求确定色谱柱的柱长、柱内径、填料孔径、填料类型等规格，同时根据方法中色谱条件如流动相比例、PH值、缓冲盐成分、流速等条件来选择合适的品牌和型号。 确定好色谱柱的规格、品牌和型号以后，填写求购单报供应部采购。 色谱柱的接收与登记： 登记台账： 色谱柱购入后，首先应检查是否与所求购的规格、品牌和型号一致、是否有出厂检测并且检测合格的证明。 检查无误后登记《色谱柱台账》，其中HPLC柱与GC柱两种色谱柱分开做台账，以便查阅。台账内容包括柱编号、品牌、序列号、型号、填料、购买日期、使用时间、使用范围、停用时间、停用原因。在接收时登记柱编号、品牌、序列号、型号、填料、购买日期；柱第一次使用时（包括活化/老化柱）登记其使用时间及使用范围。 色谱柱编号： 色谱柱编号采用代号+流水号的形式，其中气相色谱柱代